企業簡介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白質改造和酶進化技術為驅動，聚焦生命科學產業鏈上游核心原料，從事分子、蛋白和細胞三大品類生物試劑的研發、生產與銷售的高新技術企業，通過打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細胞的技術開發路徑，成為國內少數同時覆蓋三大品類生物試劑、兼備核心技術自主研發能力和規模化生產能力的高新技術企業，產品廣泛應用于生命科學研究領域、診斷與檢測領域和生物醫藥領域。
主營業務
公司憑借在蛋白質改造和酶進化領域的技術優勢和深耕生物試劑行業多年積累的豐富經驗，構建了品質優良、類型齊全、種類豐富的產品管線。自公司成立以來，公司研發、生產和銷售的生物試劑超過3000種，涵蓋分子、蛋白、細胞三大品類的生物試劑，能夠滿足客戶多種類型生物試劑的一體化采購需求。公司核心產品覆蓋qPCR系列、NGS系列、逆轉錄系列、核酸提取與純化系列、PCR系列、分子克隆系列、體外轉錄系列、抗體、蛋白純化系列、蛋白分析系列、重組蛋白、細胞分析系列、細胞培養系列、細胞轉染系列、報告基因檢測系列等多個品類的生物試劑，廣泛應用于生命科學研究、診斷檢測和生物醫藥等領域。
發展歷程
榮譽資質
翌圣生物通過申請商標和軟件著作權的方式保障核心技術和市場競爭力，不斷加強公司品牌建設。截至2022年3月31日，公司已經獲得授權18項（其中發明14項、實用新型1項、外觀設計3項）和45項與生物試劑相關的軟件著作權，擁有經國家知識產權局商標局核準的注冊商標權37項以及4項境外注冊商標，是國家高新技術企業和上海市專精特新企業。
創新平臺
經過多年的產品研發技術經驗的沉淀以及持續的研發創新，翌圣生物積極開展“產學研”合作，與擁有生物催化與酶領域國家重點實驗室的湖北大學、擁有教育部工業生物領域重點研究基地的江南大學展開合作，優化生物試劑關鍵原料的生產和表達工藝。翌圣生物以基因工程技術、生物信息技術、細胞生物學技術、免疫學技術、生化分析技術等生命科學領域的共性生物技術為基礎，建立了六大核心技術平臺——雙向分子酶理性設計與定向進化平臺、密度發酵與超潔凈純化平臺、分子診斷試劑關鍵原料研發平臺、高通量測序建庫試劑創新研發平臺、高性能單克隆抗體研發平臺和mRNA醫藥應用研發平臺，目前已經自主研發出20項核心技術，打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細胞的技術開發路徑，覆蓋技術研發、產品升級、規模生產和質量控制等生物試劑研發和生產的各關鍵環節。
工業化生產
翌圣生物擁有按照準GMP 標準建設運營的工業化生產基地，配有噸級發酵線、工業級 AKTA 純化線和全自動包裝線。同時，公司通過了ISO 13485:2016質量管理體系認證，從原料控制、生產管理、質檢管控、倉儲運輸等對生產線進行360度管理監督，保證產品過程的可控制性及可追溯性，竭盡全力為您提供可靠的產品。
客戶服務
翌圣生物憑借優質穩定的產品質量、高效及時的響應能力、快速穩定的交付能力和周到完備的售后服務獲得了眾多科研用戶和工業用戶的認可，為檢測公司、治療公司、工具類公司和科學研究實驗室提供應用于科學研究、體外診斷、基因測序、生物醫藥等的生物試劑。與中國科學院、清華大學、北京大學、復旦大學、上海交通大學、浙江大學等頂尖科研院所和華大基因、恒瑞醫藥、藥明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工業客戶建立了穩定、緊密的合作關系，公司產品被多次使用在Nature、Science、Cell等國際頂級期刊論文發表中。
公司企業文化
幫助客戶創造價值，讓世界更健康更快樂
◎ 成為生命科學工具領域全球Top⑩
◎ 具備驅動產業變革的技術創新能力
◎ 擁有一支持續學習型的翌圣鐵軍
翌圣生物始終秉承“幫助客戶創造價值，讓世界更健康更快樂”的使命，專注于技術創新和產品升級，不斷拓展核心技術的應用領域，為客戶提供更為的產品與服務，助力我國打造自主可控的生物試劑產業鏈。同時，翌圣生物將進一步推進國際化戰略，繼續布局和拓展海外市場，為全球生物試劑產業發展貢獻力量。
分子生物學試劑，細胞生物學試劑，免疫學試劑，蛋白組學試劑等
| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫療衛生,制藥/生物制藥 |
|---|
嘌呤霉素(Puromycin)是由白黑鏈霉菌(Streptomyces alboniger)發酵代謝產生的一種氨基糖苷類抗生素，通過抑制蛋白質合成而殺死革蘭氏陽性菌，各種動物和昆蟲細胞。某種特殊情況下有效作用大腸桿菌。作用機制在于嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3′末端的類似物，能夠與核糖體的A位點結合并摻入到延伸的肽鏈中。嘌呤霉素同A位點結合后，不會參與隨后的任何反應，從而導致蛋白質合成的提前終止并釋放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。
嘌呤霉素產生菌Streptomyces alboniger內發現的pac基因編碼嘌呤霉素N-乙酰轉移酶(PAC)，賦予機體對嘌呤霉素產生抗性。這一特性如今普遍應用于篩選特定攜帶pac基因質粒的哺乳動物穩定轉染細胞株。
嘌呤霉素在細胞穩轉株篩選中的普遍應用與慢病毒載體的特性有關，現在商業化的慢病毒載體多數都攜帶pac基因。在某些特定情況下，嘌呤霉素亦可以用來篩選轉化攜帶pac基因質粒的大腸桿菌菌株。
本品是無菌的、溶于蒸餾水的嘌呤霉素鹽酸鹽溶液，濃度為10 mg/mL（10 mg/mL in H2O），可直接用培養基或其他緩沖溶液稀釋使用，適用于細胞培養，常用工作濃度為1~10 µg/mL。
產品信息
貨號 | 60209ES10/60209ES50/60209ES60/60209ES76 |
規格 | 1×1 mL/5×1 mL/10×1 mL/50×1 mL |
CAS號（CAS NO.） | 58-58-2 |
分子式（Molecular Fomular） | C22H29N7O5·2HCl |
分子量（Molecular Weight） | 544.43 g/mol |
純度（Purity） | ≥98% |
外觀（Appearance） | 溶液 |
濃度 （Concentration） | 10 mg/mL（溶于水） |
結構（Structure） |
|
組分信息
組分名稱 | 60209ES10 | 60209ES50 | 60209ES60 | 60209ES76 |
規格 | 1×1 mL | 5×1 mL | 10×1 mL | 50×1 mL |
儲存條件
-25~-15℃保存，有效期1年。
使用說明
1. 建議使用濃度
哺乳動物細胞：1~10 μg/mL，最佳濃度需要殺滅曲線來確定。推薦濃度，請看表1。
大腸桿菌：LB瓊脂培養基篩選穩定轉化pac基因的大腸桿菌，使用濃度為125 μg/mL。
【注】：使用嘌呤霉素篩選大腸桿菌穩轉株需要精確的pH值調節，而且受宿主細胞本身的影響。
表1 嘌呤霉素鹽酸鹽的推薦濃度
細胞系 | 嘌呤霉素濃度 | 參考文獻 |
B16（小鼠黑素細胞） | 1~2 μg/mL | [1],[2] |
HEK293（人胚胎腎細胞） | 0.5~10 μg/mL | [3] |
HeLa（人宮頸癌細胞） | 1~10 μg/mL | [4]，[5] |
MEF（小鼠成纖維細胞） | 1-5 μg/mL | [4] |
HepG2（人肝細胞癌） | 0.5~5 μg/mL | [6]，[7] |
A549（肺癌細胞） | 1.5 μg/mL | [8] |
人胚胎干 (ES) 細胞 | 0.5~5 μg/mL | [9] |
嘌呤霉素殺滅曲線的確定（以shRNA轉染或者慢病毒轉導為例）
嘌呤霉素有效篩選濃度跟細胞類型、生長狀態、細胞密度、細胞代謝情況及細胞所處細胞周期位置等有關。為了篩選到穩定表達的shRNA細胞株，確定殺死未轉染/轉導細胞的濃度嘌呤霉素至關重要。建議初次做實驗的客戶一定要建立適合自身實驗體系的殺死曲線(kill curve)。
1）Day 1：24孔板內以5~8×104 cells/孔的密度鋪板，鋪足夠量的孔，以確保后續的梯度實驗的進行，37℃細胞孵育過夜。
2）Day 2：①準備篩選培養基：含不同濃度嘌呤霉素的新鮮培養基（如0~15 μg/mL，至少5個梯度）；②往孵育過夜后的細胞內更換新鮮配制的篩選培養基；之后37℃孵育細胞。
3）Day 4：更換新鮮的篩選培養基，并觀察細胞存活率。
4）根據細胞的生長狀態，約2-3天更換新鮮的篩選培養基。
5）每日監測細胞，觀察存活細胞率，確定抗生素篩選開始4~6天內有效殺死非轉染或所有非轉導細胞的藥物濃度。
3. 哺乳動物穩定轉染細胞株的篩選
等轉染含有pac基因的質粒后，細胞在含有嘌呤霉素的培養基中增殖，以篩選出穩定轉染子。
1）細胞轉染48 h后，將細胞（原樣或稀釋）置于含有適當濃度嘌呤霉素的新鮮培養基中培養。
【注】：當細胞處于分裂活躍期時，抗生素作用。細胞過于密集，抗生素產生的效力會明顯下降。最好進行細胞分盤使其密度不超過25%。
2）每隔2~3天，移除和更換含有嘌呤霉素的培養基。
3）篩選7天后評估細胞形成的病灶。病灶可能需要額外的一周或者更多時間，這依賴于宿主細胞系和轉染篩選效率。
【注】：每日進行細胞生長狀態的觀察。嘌呤霉素的篩選至少需要48 h，有效濃度嘌呤霉素的篩選周期一般在3-10天。
4）轉移和放置5~10個抗性克隆到一個35 mm的培養皿中，用選擇培養基繼續培養7天。此次富集培養是為日后的細胞毒性實驗做準備。
注意事項
1.嘌呤霉素為有毒化合物，操作時請小心拿放。
2.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
3.本產品僅用于科研用途，禁止用于人身上。
參考文獻
[1] Furge KA. et al., 2001. Suppression of Ras-mediated tumorigenicity and metastasis through inhibition of the Met receptor tyrosine kinase. PNAS 98:10722-7.
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[9] Paatero A O , Hilkka T , Happonen L J , et al. Bacteriophage Mu integration in yeast and mammalian genomes[J]. Nucleic Acids Research, 2008, 36(22):e148-e148.
客戶使用本產品發表的科研文獻（部分）
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[2] Lu T, et al. CD73 in small extracellular vesicles derived from HNSCC defines tumour-associated immunosuppression mediated by macrophages in the microenvironment. J Extracell Vesicles. 2022 May;11(5): e12218. doi: 10.1002/jev2.12218. PMID: 35524455; PMCID: PMC9077142.
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[5] Sun Q, et al. MORTALIN-Ca2+ axis drives innate rituximab resistance in diffuse large B-cell lymphoma. Cancer Lett. 2022 Jul 1; 537:215678. doi: 10.1016/j.canlet.2022.215678. Epub 2022 Apr 18. PMID: 35447282.
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