植物類黃酮（Flavonoid）試劑盒說明書

可見分光光度法

注意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。 

產品內容： 

提取液：60%乙醇，自備。 

試劑一：液體3mL×1瓶，4℃保存。 

試劑二：液體3mL×1瓶，4℃保存。 

試劑三：液體20mL×1瓶，4℃保存。 

產品說明： 

類黃酮是一類多苯化合物，屬于植物次生代謝物，對人體具有消炎，抗菌，降血脂，清除體內羥自由基，預防癌癥等作用。 

在堿性亞硝酸鹽溶液中，類黃酮與鋁離子形成在502nm處有特征吸收峰的紅色絡合物，測定樣品提取液在502nm處的吸光值，即可計算樣品類黃酮含量。 

自備實驗用品及儀器

天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。 

操作步驟：

一、類黃酮提取 

將樣本烘干至恒重，粉碎，過40目篩之后，稱取約0.1g，加入2.5mL提取液，用超聲提取法進行提取，超聲功率300W，破碎5s，間歇8s，60℃，提取30min。10000g，25℃，離心10min，取上清，用提取液定容至2.5mL，待測。 

二、測定操作表

三、 類黃酮含量計算公式 

標準曲線：y = 6.2096x+0.0008，R² = 0.9996

類黃酮含量（mg/g）=（A502-0.0008）÷6.2096×V反總÷(V樣÷V樣總×W)= 2.013×A502÷W

V樣總：加入提取液體積，2.5mL； V反總：反應總體積，1mL；V樣：反應中樣品體積，0.2mL；W：樣品質量，g

注意事項： 

• 吸光值大于0.8，樣品適當稀釋再測定，注意計算公式里乘以稀釋倍數。 
• 顯色完成后立即測定，2小時后吸光值會下降。 
• 低檢出限為12.8μg/g。