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在腫瘤相關蛋白定性研究中的應用2021/9/7
利用shotgun的蛋白組技術,可以實現對復雜樣品中大量蛋白質的定性分析,進而為闡明腫瘤相關蛋白質的相互作用、信號通路組成及蛋白質亞細胞定位提供依據。Dawson等人發表于2011年《Nature》上...
在腫瘤相關蛋白定量研究中的應用2021/9/7
利用非標記(2D,Labelfree)及標記(DIGE、SILAC、iTRAQ)定量的蛋白組技術與方法,可以實現對不同樣品中的大量蛋白進行大規模的相對定量研究,進而為相關具體機制的深入闡明提供基礎和思...
蛋白質組學生物信息學的作用和影響2021/9/6
蛋白質組學本身是一門大科學,其產生的數據量是十分龐大。如何將大量的蛋白質組學數據進行儲存和加工,使之轉變成可以理解的具有生物學意義的結果比如蛋白質名稱,多肽序列,蛋白質結構,蛋白質差異等;如何使蛋白質...
認識蛋白質組學鑒定技術2021/9/6
在蛋白質組學研究流程中,蛋白質鑒定技術是最關鍵的部分。在蛋白質組分離技術方面還有凝膠電泳技術和色譜技術的選擇,而蛋白質鑒定技術方面卻只是生物質譜技術(BioMassSpectrometry)一枝獨苗。...
【蛋白技術】蛋白標簽TAG是什么高大上的東西?2021/9/3
首先,蛋白標簽(proteintag)是什么?蛋白標簽(proteintag)是指利用DNA體外重組技術,與目的蛋白一起融合表達的一種多肽或者蛋白,以便于目的蛋白的表達、檢測、示蹤和純化等。蛋白標簽大...
酵母雜交實驗——從一無所知到略知一二2021/9/3
低分文章要想逆襲,實現向高分文章的跳躍,就一定少不了要將細胞豪門中分子間錯綜復雜的關系屢屢清楚。為了找尋能讓自家目的蛋白榮登科研“頭條榜”的“花邊新聞”,一眾科研者可謂是操碎了心。慶幸的是,酵母雙雜交...
Get到這幾招,方可輕松搞定SDS-PAGE電泳實驗!2021/9/3
SDS-PAGE作為一個老生常談的實驗,早已廣為科研者所知。然而該實驗雖然基礎,但是細節繁瑣,耗時長久,光是配制試劑就要花費2個小時左右。而這還只是Westernblot(WB)的第一步,也使得完成W...
【技術】提升蛋白質樣品質量,三招就足夠!2021/9/3
在制備中丟失的蛋白質是永遠不可能在后面的實驗中彌補回來的。蛋白質樣品制備是許多實驗重要的第一步。為什么要進行樣品的制備?電泳的目的不就是分離嗎?剛剛接觸時有這樣的疑問。然并卵,由于雙向電泳一般只能分辨...
真核細胞轉染操作方法2021/9/3
一些真核蛋白在原核宿主細胞中的表達不但行之有效而且成本低廉,然而許多在細菌中合成的真核蛋白或因折疊方式不正確,或因折疊效率低下,結果使得蛋白活性低或無活性。不僅如此,真核生物蛋白的活性往往需要翻譯后加...
細胞轉染操作方法及各方法比較2021/9/2
轉染,是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍...
尋找轉錄因子與基因啟動子的結合點2021/9/2
經過EMSA、DNase1足跡實驗、甲基化干擾實驗、體內足跡實驗、Chip-on-chip等方式,終于落實了轉錄因子跟基因的關系,繼續探索轉錄因子跟該基因的啟動子的結合位點在哪里?第一步,要確定到啟動...
關于lncRNA,你必須知道的秘密(內附彩蛋)2021/9/2
lncRNA一開始被認為是由RNA聚合酶II轉錄形成的轉錄副產物,并沒有生物學功能,只是一種轉錄噪音(遺傳噪音)。然后,現在越來越多的研究發現lncRNA有及其重要的生理功能,這些功能包括:遺傳印記(...
IncRNA系列:lncRNA的生物學功能介紹2021/9/2
(一)lncRNA對于細胞周期及凋亡的調控作用有研究報道,lncRNA可以通過調節細胞周期和凋亡的方式,來影響細胞的增殖。例如,Gas5(growtharrest-specific5,非編碼RNA)在...
【專欄】一文總結LncRNA研究思路2021/9/2
lncRNA參與了X染色體沉默,基因組印記以及染色質修飾,轉錄激活,轉錄干擾,核內運輸等多種重要的調控過程,很多人看到lncRNA的熱點還沒有過去,經常會問如果沒有相關的工作基礎,如何開始lncRNA...
詳解miRNA的誕生之旅2021/9/1
miRNA是由內源性發卡結構轉錄產物衍生而來的一種長為19-25nt左右的單鏈RNA。第一,miRNA基因最先被RNApolymeraseII轉錄生成5'蓋帽和3‘加尾的初級轉錄體,稱為pri-miR...

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