漆酶（Laccase）試劑盒說明書

微量法

注意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義

漆酶（CE1.10.3.2）是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高等植物中，具有較強的氧化還原能力，在紙漿生物漂白，環境污染物降解和木質纖維素降解

以及生物檢測方面有非常廣泛的應用。

測定原理

漆酶分解底物ABTS產生ABTS自由基，在420nm處的吸光系數遠大于底物ABTS，測定ABTS自由基的增加速率，可計算得漆酶活性。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、恒溫水浴鍋。

試劑組成和配制

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：液體 15mL×1 瓶，4℃保存。

工作液：粉劑×2 瓶，4℃避光保存，臨用前加7.5mL試劑一溶解。

酶液提取

1． 組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g 組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2． 細胞：按照細胞數量（10⁴個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后 4℃，10000g離心10min，取上清置于冰上待測。

3． 細胞培養液：直接檢測。

測定操作表