甜菜堿（Betaine）含量試劑盒說明書

微量法

注意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義

甜菜堿是一種廣泛分布于動(dòng)植物及微生物體內(nèi)的季銨型水溶性生物堿，是生物體內(nèi)膽堿的氧化產(chǎn)物，可以增強(qiáng)免疫力、降血脂、抗氧化、抗腫瘤，并可作為甲基供體，參與促進(jìn)動(dòng)物蛋

白質(zhì)和脂肪代謝、增進(jìn)食欲、緩和應(yīng)激、調(diào)節(jié)滲透壓、穩(wěn)定維生素等多種生物作用，在化工、

醫(yī)藥、食品添加劑等領(lǐng)域有較廣泛的應(yīng)用。

測(cè)定原理

甜菜堿在強(qiáng)酸條件下和雷氏鹽發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生沉淀，沉淀用丙酮溶解形成紅色溶液，在 525nm處有特征吸收峰，測(cè)定525nm處的吸光值，可計(jì)算得樣品的甜菜堿含量。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、甲醇、、鹽酸和蒸餾水。

試劑組成和配制

提取液（自備）：80%甲醇。取80mL甲醇，加20mL蒸餾水。

標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑 1mg×2 支，4℃保存，臨用前加1mL蒸餾水充分溶解。

試劑一：粉劑 0.12g×2 瓶，4℃保存，臨用前根據(jù)用量配制，每瓶加4mL蒸餾水溶解，加78μL濃鹽酸調(diào) pH為1。

試劑二：99%，自備。取無水5.94mL ，加入蒸餾水0.06mL ，混勻。

試劑三：70%丙酮，（ 易揮發(fā)，根據(jù)用量自備，丙酮：蒸餾水=7:3）。

甜菜堿提取

取烘干后過40目篩的樣品約0.2g，加1mL提取液，置于60℃提取30min，期間不斷震蕩。10000g，25℃，離心15min，取上清液。

測(cè)定操作表

1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至525nm。

2、操作表

注意：標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。