實(shí)驗(yàn)步驟
基本方案 小鼠巨噬細(xì)胞的活化
材料
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)elisa試劑盒,靜 息 狀 態(tài)(單 元 6.1)
D M E M - 10 : 含 1 0 % (V /V ) FBS (HyCloxie) 和 50 ug/1111 硫酸慶大霉素的 D M E M
培 養(yǎng) 基(G I B C O /B R L )
輔助方案炎性小鼠巨噬細(xì)胞的活化
附加材料
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒炎性巨噬細(xì)胞:促炎劑刺激后的小鼠腹腔巨嗟細(xì)胞(單 元 6.1)
2 4 孔 平 底 細(xì)胞培養(yǎng)板(Costar)
1 . 設(shè)置實(shí)驗(yàn)組和對照組(見基本方案步驟 1),在 2 4 孔板中每孔加入 0.5m l 細(xì)胞懸液。
2 . 置 37°C , 5 % C 〇 2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng) I h 使巨噬細(xì)胞貼壁。
3 . 棄上清后,沿孔壁緩慢加入 Iml D E M E M - I O 培養(yǎng)基,避免破壞貼壁細(xì)胞層。重復(fù)洗滌 2 次 ,zui后加入 0.5 ml D E M E M - I O 培養(yǎng)基。
4 . 致敏及激活巨噬細(xì)胞,參見基本方案步驟 2 和 4 。
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