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氨基酸序列鑒定蛋白質是蛋白質組學研究中的核心技術之一,它通過解析蛋白質的氨基酸組成和排列順序揭示其結構與功能信息。這一過程有助于蛋白質鑒定、功能研究、翻譯后修飾分析以及新型生物標志物的發現。由于蛋白質的功能直接取決于其氨基酸序列,氨基酸序列鑒定蛋白質不僅能夠幫助科學家確認目標蛋白的身份,還能為結構生物學、藥物開發及疾病研究提供數據支持。在生物醫學研究中,氨基酸序列鑒定蛋白質可用于識別未知蛋白,解析疾病相關蛋白的變異情況并幫助開發針對特定靶點的藥物。在生物技術和合成生物學領域,該技術能夠用于優化重組蛋白的表達,提高工業酶、抗體或疫苗的生產效率。此外,在食品安全、環境監測等應用中,蛋白質鑒定技術也被廣泛用于檢測污染物或特定生物分子的存在。盡管氨基酸序列鑒定蛋白質技術已取得顯著進展,但仍面臨諸多挑戰。例如,蛋白質的翻譯后修飾(如磷酸化、乙酰化、糖基化等)可能影響序列解析的準確性。此外,高復雜度樣本(如血漿、組織樣本)中的蛋白濃度跨度極大,低豐度蛋白的鑒定仍然具有挑戰性。為了解決這些問題,研究人員開發了多種技術優化方案。例如,高分辨率質譜的應用提高了序列解析能力,而高效的蛋白富集方法(如親和純化、等電聚焦)能夠增強低豐度蛋白的檢測率。
氨基酸序列鑒定蛋白質主要依賴高精度質譜技術和生物信息學工具以確保序列解析的準確性。以下是幾種主要的技術方法:
1、質譜(MS)分析:現代質譜技術是蛋白質序列鑒定的核心工具,如串聯質譜(MS/MS)和高分辨率質譜(HRMS)。質譜分析通過將蛋白質或肽段電離并測量其質荷比(m/z),從而推導出氨基酸序列信息。基于數據依賴采集(DDA)或數據獨立采集(DIA)的質譜技術能夠提供高通量、高靈敏度的蛋白質鑒定能力。
2、Edman降解:這種經典的化學方法適用于較短的多肽序列分析,Edman降解通過逐步從肽鏈的N-端切割氨基酸并通過色譜或光譜分析確定其種類。然而由于其對長肽或翻譯后修飾蛋白的限制性,現代研究更傾向于使用質譜技術進行氨基酸序列鑒定蛋白質。
3、蛋白酶解法:為了提高序列解析的效率,蛋白質通常需要經過蛋白酶(如yídànbáiméi、Lys-C、Glu-C等)的酶解處理將其分解為適合質譜檢測的肽段。多重蛋白酶消化策略可以提供更全面的序列覆蓋度,提高蛋白鑒定的jīngquè度。
4、生物信息學數據分析:質譜數據的處理依賴于zhuānyè的數據庫搜索和算法解析。例如,Mascot、Sequest 和 MaxQuant等軟件可用于比對質譜數據與蛋白數據庫,推導蛋白的氨基酸序列。此外,去新肽(De novo sequencing)算法能夠在數據庫匹配失敗的情況下直接基于碎片離子信息預測蛋白序列,適用于新發現蛋白或非模式生物的蛋白質鑒定。
百泰派克生物科技依托優良的質譜分析平臺和zhuānyè的生物信息學團隊,為科研人員提供高質量的蛋白鑒定服務。我們結合高分辨率質譜、深度數據庫解析和創新的蛋白酶解策略,為客戶提供jīngzhǔn、高效的蛋白序列分析解決方案。
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對蛋白質序列進行分析,提供基于質譜的蛋白測序分析服務,包括對蛋白質的氨基酸組成分析,N端測序,C端測序和全序列分析,以及基于埃德曼降解的蛋白質N端序列分析服務。對于未知理論序列的蛋白質,提供基于從頭測序法的蛋白質從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。
※服務優勢:
1.采用目前世界上優良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;
3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;
4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;
5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;
6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,提供定量蛋白質組學、靶向蛋白質組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種蛋白質組學分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白質組學服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。
※服務優勢:
1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析,發現新的生物標記物;
2.體內體外多種蛋白質標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;
3.質譜分析靈敏度高,實驗結果重復度高;
4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;
5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統準確。
百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質量譜,zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。
※服務優勢:
1.技術優良,*技術空白
采用金屬標記抗體技術,避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。
2.分析數量大,成本較低
單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右,而流式質譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現了數量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。
3.應用前景大
①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;
②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外,質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾;
③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。
百泰派克基于高分辨率質譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從蛋白質、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析,到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務,幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。
北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證,建立了完備的質量體系,數據冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。
1.公司采用ISO9001質量控制體系,zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務;
2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務;
3.業務范圍覆蓋蛋白質組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等;
4.七大質量控制檢測平臺,滿足您一站式服務需求;
5.服務3000+企業,10000+客戶的選擇;
6.致力于為您提供優質的生物質譜分析服務!
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