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從原理到實操，蝦青素抗肝纖維化實驗流程！（1）2025/4/16
1實驗原理C57BL/6J小鼠可通過化學誘導（如二甲基亞硝胺DMN）建立肝纖維化模型。肝纖維化進展伴隨以下病理特征：HSC活化→肌成纖維細胞增殖，分泌Ⅰ/Ⅲ型膠原。ECM失衡：基底膜膠原（Ⅳ型）被纖維...
如何解決細胞鋪板不均勻的問題2025/4/15
細胞鋪板不均勻會對實驗結果的準確性和可重復性造成影響，解決這一問題可從實驗前準備、鋪板操作、后續處理等方面著手：實驗前準備確保細胞狀態良好：選用處于對數生長期、活力高且形態正常的細胞。比如培養HeLa...
細胞鋪板具體操作及流程2025/4/14
細胞鋪板是細胞實驗中的基礎操作，其目的是將細胞均勻分布在培養板上，以保證實驗結果的準確性和可重復性。下面為你介紹詳細操作流程：1.實驗準備材料：細胞懸液、培養基、胰酶、PBS緩沖液、血清、96孔板或2...
蛋白磷酸化解決方案2025/4/11
創新磷酸結合標簽GLPBIO的PHOS-TAG,一種創新的科研工具，可在中性PH條件下特異性捕獲蛋白質絲氨酸/蘇氨酸/酪氨酸上的磷酸基團，不放過任何一個氨基酸的磷酸化!深入探究蛋白質世界PHOS-TA...
為何你的平板“空空如也”？感受態細胞轉化的這幾個小細節你注意到了嗎？2025/4/9
1.前言在分子克隆實驗中，感受態細胞轉化是基因克隆的基礎步驟之一。但相信很多同學在涂板后，常常會出現平板上菌落稀少甚至“空空如也”的尷尬局面，這不僅耽誤我們的實驗進度，還會消耗寶貴的試劑和時間。實驗為...
細胞凋亡-早期凋亡檢測的優選2025/4/8
Annexinv-PE/7-AADApoptosisDetectionkit-早期凋亡檢測的優選紅色熒光標記可與綠色熒光實現共染適用范圍:懸浮細胞、貼壁細胞保存條件：2-8°C保存產品概述在正常細胞中...
細胞凋亡-更亮、更穩定的紅色熒光2025/4/8
抗淬滅因子高活性重組TdT酶,保證熒光摻入效率適用范圍:細胞樣品、石蠟切片、冰凍切片保存條件：-20°C保存；BrightRedLabelingMix避光儲存于-20°C產品概述本試劑盒采用TUNEL...
細胞凋亡--綠色熒光檢測凋亡2025/4/7
TUNELFITCApoptosisDetectionKit綠色熒光檢測凋亡綠色熒光標記適用范圍：細胞樣品、石蠟切片、冰凍切片保存條件：-20°C保存；FITC-12-dUTPLabelingMix避...
細胞死亡的三種方式以及倆種凋亡細胞的檢測方法（Tunel、Annexin V）2025/4/1
細胞死亡動物細胞的死亡主要有三種方式：細胞凋亡、細胞壞死和細胞自噬。目前對動物細胞凋亡的特征、機制和生物學功能的研究較為深入。細胞凋亡也被稱為程序性細胞死亡(programmedcellDeath,P...
分子克隆實驗---第三章：測序結果解讀2025/3/31
一代測序是克隆實驗中常見的下游實驗。現代DNA測序技術源于Sanger鏈末端終止測序法，其工作原理與Sanger測序不同的是4組反應的雙脫氧核苷酸分別用不同的熒光分子標記，每個試管的產物在光激發下發出...
分子克隆實驗的流程及注意事項--四、定點突變2025/3/24
四、定點突變定點突變引物設計與PCR擴增1.引物設計要求：5’-15-21bp反向互補區域+至少15bp非互補區域-3’，反向互補區域GC含量40%-60%，待突變位點至引物3’端Tm值60°C。根據...
分子克隆實驗的流程及注意事項--三、同源重組2025/3/19
本方法適用于總長度（載體+所有片段）不超過20kb的重組實驗。目的片段引物設計與PCR擴增1.2.1.引物同源臂設計要求：15-20bp(不計算酶切位點)，GC含量40%-60%；根據實驗需求選擇對應...
分子克隆實驗的流程及注意事項--二、TOPO克隆2025/3/18
二、TOPO克隆引物設計與PCR擴增1.目的片段PCR擴增引物合成時，要求引物5’端不可磷酸化修飾；2.建議使用高保真酶進行目的片段的PCR擴增，并摸索退火溫度，優化反應體系和程序。PCR產物的純化回...
分子克隆實驗的流程及注意事項--一、酶切連接2025/3/17
一、酶切連接一般來說，限制性內切酶的選擇非常重要。建議從以下方面判斷選擇：1.限制性內切酶的識別序列在目的載體中存在且只有一個，在目的片段中不存在；2.盡量選擇酶切產物為粘性末端、酶切效率高的限制性內...
分子克隆實驗解決方案-第一章：分子克隆實驗概述2025/3/14
第一章：分子克隆實驗概述分子克隆技術是目前實驗室常用的實驗技術之一，研究者運用該技術能夠將DNA片段以體外重組的方式構建至載體，研究者運用該技術能夠將DNA片段以體外重組的方式構建至載體，隨后通過轉化...
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