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詳細介紹
產品品牌：zcibio（茁彩生物）
產品名稱：人脂肪細胞膜關聯蛋白（APMAP）ELISA試劑盒
英文名稱：Human APMAP ELISA kit
產品規格：48T/96T
實驗樣本：血清、血漿、細胞上清液、組織等。
應用領域：人脂肪細胞膜關聯蛋白（APMAP）ELISA試劑盒僅供科研實驗，不得用于臨床診斷。
保存條件：2~8℃，有效期6個月。
產品簡介：
預期應用：人脂肪細胞膜關聯蛋白（APMAP）ELISA試劑盒是一個夾心酶免疫分析法體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關生物液體樣本中的濃度。
需自備的設備及試劑：
1.450±10nm濾光片酶標儀（建議儀器使用前預熱）
2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.
3.Eppendorf 移液器.
4.蒸餾水或去離子水.
5.脫脂棉吸水紙.
6.37℃恒溫箱
7.100ml和1000ml量筒.
標本的采集與保存：
1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融
2.血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3.組織勻漿：用預冷的 PBS (0.01mol/L, pH=7.2-7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織再剪碎。將剪碎的組織不對應體積的 PBS（一般按 1:9 的重量體積比，比如 1g 的組織樣品對應 9mL 的 PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記彔。推薦在 PBS 中加入蛋白酶抑制劑）加入玱璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。后將勻漿液于 5000×g 離心 5~10 分鐘，取上清檢測。
4.細胞培養上清或其他生物標本：請 1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
注意:
1.以上標本均需密封保存，4℃保存應小于一周，-20℃ 不應超過1個月，-80℃保存可放置更久。
2.標本使用前應緩慢均衡至室溫，不應加熱使之溶解。
3.標本溶血會影響后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。
標本說明：
1.本公司只對試劑盒本身負責，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預留充足的樣本。
2.實驗前應預測標本含量，如果標本濃度過高，應對標本進行稀釋，使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。
3.若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中，建議進行預實驗驗證其有效性，并注意留存樣本。
4.使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質的引入導致ELISA實驗結果偏差。
5.若樣本為細胞培養上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細胞狀態、細胞數量、采樣時間等，所以可能存在檢測不出的情況。
6.某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因為產品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測出。
7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
實驗原理：
將目標抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標準品或標本，其中的目標連接于固相載體上的抗體結合，然后加入微生物化的目標抗體，將未結合的抗體洗凈后，加入HRP標記和親和素，再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（O.D.值），計算樣品濃度。
精密度：
精密度用樣品測定值的變異系數CV表示。CV（%）=SD/mean×100
批內差：取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測，每份樣本連續測定20次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差：選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本定量測定，每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內差: CV<10% Inter-批間差: CV<13%
警告：
本試劑盒中使用了稀硫酸作為終止液，其具有輕微腐蝕性，使用時應避免接觸衣物或眼、手等皮膚暴露部位。
友情提醒：試劑盒使用完畢后，請妥善處理相關耗材，避免環境污染！
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