国产在线无码视频一区_免费看片A级毛片免费看_国产午夜福利精品一区二区三区_99久久人妻精品免费一区

您好, 歡迎來到化工儀器網

| 注冊| 產品展廳| 收藏該商鋪

17801761073

technology

首頁   >>   技術文章   >>   IPTG配制的方法及使用說明

北京索萊寶科技有限公司

立即詢價

您提交后,專屬客服將第一時間為您服務

IPTG配制的方法及使用說明

閱讀:9014      發布時間:2016-4-26
分享:

IPTG是一種作用*的誘導劑,不被細菌代謝而十分穩定,因此被實驗室廣泛應用。IPTG溶液的配制很簡單:在8ml蒸餾水中溶解2g IPTG后,用蒸餾水定容10ml,用0.22μm濾器過濾除菌,分裝成1ml小份貯存于-20℃。

IPTG的使用方法:

先把IPTG配制成24mg/ml(100mM)的水溶液,并進行過濾除菌后保存。然后在100ml的瓊脂培養基中,加入100μl的上述溶液、200μl的X-Gal(20?mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液)和100μl的Amp(100mg/ml),制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培養基。當DNA片段插入pUC系列載體(或其他帶有lacZ、Amp基因載體),然后轉化lacZ缺失細胞中后,涂布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培養基,可根據長出菌體的藍白色,而方便地挑選出基因重組體(白色為具有DNA插入片段的基因重組體)。

選用IPTG作誘導物的原因

能誘導酶的合成,但又不被分解的分子,稱為安慰誘導物(gratuitousinducer)。?由于乳糖雖可誘導酶的合成,但又隨之分解,產生很多復雜的動力學問題,因此人們常用安慰誘導物來進行各種實驗。X-gal(5-溴-4-錄-3-吲哚-β-半乳糖苷)也是一種人工化學合成的半乳糖苷,可被β-半乳糖苷酶水解產生蘭色化合物,因此可以用作β-半乳糖苷酶活性的指示劑。IPTG和X-gal都被廣泛應用在分子生物學和基因工程的工作中。

某些誘導物與自然的β-半乳糖苷酶相似,且不能?被酶分解,比如異丙基-β-D-硫代半乳糖苷,(isopropylthiogalactoside,IPTG)。不被細菌分不被細菌分解性質穩定,解性質穩定,它的濃度在實驗中不會改變。復雜的動力學問題,便于研究。IPTG能在缺乏lacY基因下而有效地被運送。半乳糖苷鍵中用硫代替了氧,失去了水解活性,半乳糖苷鍵中用硫代替了氧失去了水解活性,但硫代半乳糖苷和同源的氧代化合物與酶位點的親和力相同,雖不為β-半乳糖苷酶所識的親和力相同,IPTG雖不為半乳糖苷酶所識雖不為但它是lac基因簇十分有效的誘導物

基因簇十分有效的誘導物。但它是基因簇十分有效的誘導物。

IPTG是β–半乳糖苷酶的活性誘導物質。基于這個特性,當pUC系列的載體DNA(或其他帶有lacZ 基因載體DNA)以lacZ 缺失細胞為宿主進行轉化時、或用M13噬菌體的載體DNA進行轉染時。

會員登錄

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 衡水市| 广饶县| 佳木斯市| 娱乐| 多伦县| 江口县| 调兵山市| 上高县| 界首市| 东丽区| 三亚市| 东平县| 定西市| 江阴市| 包头市| 石家庄市| 凌海市| 通城县| 灵台县| 辉县市| 怀远县| 张家界市| 颍上县| 德州市| 三穗县| 肇庆市| 纳雍县| 黄冈市| 监利县| 无极县| 沂水县| 祁连县| 沙雅县| 米脂县| 五指山市| 洪泽县| 林甸县| 宁河县| 南投县| 丹东市| 格尔木市|