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結(jié)晶紫染液的配制方法

閱讀:19066      發(fā)布時(shí)間:2016-4-25
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結(jié)晶紫染色液(Crystal Violet Staining Solution)是一種組織或細(xì)胞染色時(shí)常用的可以把細(xì)胞核染成深紫色的染色液。結(jié)晶紫是一種堿性染料,可以和細(xì)胞核中的 DNA 結(jié)合,從而產(chǎn)生細(xì)胞核染色。結(jié)晶紫染液的配制方法如下:
結(jié)晶紫染液的配制
結(jié)晶紫(crystal violet)液:結(jié)晶紫乙醇飽和液(結(jié)晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL,1%草酸銨水溶液80mL 將兩液混勻置24h后過(guò)濾即成。
結(jié)晶紫染液使用方法
1. 樣品處理
a) 對(duì)于石蠟切片:
二甲苯中脫蠟 5-10 分鐘。
換用新鮮的二甲苯,再脫蠟 5-10 分鐘。
無(wú)水乙醇 5 分鐘。
90%乙醇 2 分鐘。
70%乙醇 2 分鐘。
蒸餾水 2 分鐘。
b) 對(duì)于冰凍切片:
蒸餾水 2 分鐘。
c) 對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞:
用 4%多聚甲醛固定 10 分鐘以上。
蒸餾水洗滌 2 分鐘。
換用新鮮的蒸餾水,再洗滌 2 分鐘。
2. 結(jié)晶紫染色
對(duì)于上述處理好的樣品:
結(jié)晶紫染色液染色 10 分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。
用蒸餾水或自來(lái)水充分洗滌后即可進(jìn)行觀察和拍照。

甲紫,(異名:龍膽紫、結(jié)晶紫,英文名:Methylrosanilnium Chloride Solution;crystal violet;gentian violet),俗名即紫藥水。以上就是結(jié)晶紫染色的配制方法及使用步驟,僅供參考。

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