POD-2 -V 過氧化物酶(POD)測試盒
參考價 | ¥ 300 |
訂貨量 | ≥1盒 |
- 公司名稱 萊貿生物科技(上海)有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 POD-2 -V
- 產地 上海市
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2024/5/14 15:29:20
- 訪問次數 515
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供貨周期 | 現貨 | 貨號 | POD-2 -V |
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應用領域 | 生物產業,制藥/生物制藥,綜合 |
過氧化物酶(POD)測試盒
分光光度法50管/48樣
注 意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
POD(EC 1.11.1.7)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物,具有消除過氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。
測定原理:
POD催化H2O2氧化特定底物,在470nm有特征光吸收。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水
試劑的組成:
提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體50mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體100μL×1支,4℃保存;
試劑三:液體100μL×1支,4℃保存。
過氧化物酶(POD)測試盒
粗酶液提?。?/span>
1、細菌、細胞或組織樣品的制備:
細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測。
測定步驟和加樣表:
1、分光光度計預熱30min以上,調節波長至470nm,蒸餾水調零。
2、工作液的配制:臨用前將試劑一、試劑二、試劑三按照2.6(mL):1.5(μL):1(μL)的比例混勻;在37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預熱10min以上;現配現用。
3、在1mL玻璃比色皿中加入50μL樣本和950μL工作液,混勻,記錄470nm下1min時吸光值A1和2min后的吸光值A2。計算ΔA=A2-A1。
注意:
如果ΔA小于0.005,可將反應時間延長到5min。如果ΔA大于0.5,可將樣本用提取液稀釋后測定,計算公式中乘以相應稀釋倍數。
POD活性計算:
1、血清(漿)POD活性
單位定義:每mL血清(漿)在每mL反應體系中每分鐘A470變化0.01為一個酶活力單位。
計算公式:
POD(U/mL)=ΔA×V反總÷V樣÷0.01÷T =2000×ΔA
2、組織、細菌或細胞POD活性
(1) 按樣本蛋白濃度計算
單位定義:每mg組織蛋白在每mL反應體系中每分鐘A470變化0.01為一個酶活力單位。
POD(U/mg prot)=ΔA×V反總÷(V樣×Cpr)÷0.01÷T =2000×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位定義:每g組織在每mL反應體系中每分鐘A470變化0.01為一個酶活力單位。
POD(U/g 鮮重)=ΔA×V反總÷(W× V樣÷V樣總)÷0.01÷T =2000×ΔA÷W
(3)按細菌或細胞密度計算
單位定義:每1萬個細菌或細胞在每mL反應體系中每分鐘A470變化0.01為一個酶活力單位。
POD(U/104 cell)=ΔA×V反總÷(500×V樣÷V樣總)÷0.01÷T =4×ΔA
V反總:反應體系總體積,1mL; V樣:加入樣本體積,0.05mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,1 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量;500:細菌或細胞總數,500萬。
過氧化物酶(Peroxidase,POD)試劑盒說明書
分光光度法50管/48樣
注 意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
POD(EC 1.11.1.7)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物,具有消除過氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。
測定原理:
POD催化H2O2氧化特定底物,在470nm有特征光吸收。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水
試劑的組成:
提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體50mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體100μL×1支,4℃保存;
試劑三:液體100μL×1支,4℃保存。
粗酶液提取:
1、細菌、細胞或組織樣品的制備:
細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約