自備儀器和用品：

紫外分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調節移液器、1mL 石英比色皿和蒸餾水。

操作步驟：

一、粗酶液提取：

1. 組織：按照組織質量（g）:試劑一體積(mL)為1：5~10 的比例（建議稱取0.1g 組織，加入1mL 試劑一）進行冰浴勻漿。10000rpm，4℃離心10min，取上清置冰上待測。

2. 細菌、真菌：按照細胞數量10⁴個：試劑一體積（ml）500~1000:1 的比例,建議500 萬細胞加入1mL 試劑一），冰浴超聲波破碎細胞（率300w，超聲3 s，間隔7s，總時間3min）然后10000rpm，4℃，離心10min，取上清置冰上待測。

3. 血清等液體：直接測定。

二、測定操作:

1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。

2. 混合試劑在25℃或者37℃（哺乳動物）水浴中預熱30min 以上。

3. 空白管：依次在1mL石英比色皿中加入100μL 蒸餾水、800μL 預熱的混合試劑，100μL試劑四，迅速混勻后于340nm處測定第10 s和第190s的吸光值，分別記為A空1和A空2，△A 空白管= A空1﹣A空2。

4. 測定管：依次在1mL 石英比色皿中加入100μL 上清液、800μL 預熱的混合試劑，100μL試劑四，迅速混勻后于340nm 處測定第10 s和第190s 的吸光值，分別記為 A測1 和A測2，△A 測定管= A測1﹣A測2。

注意：空白管只需測定一次。