實驗中所需儀器及設備：

研缽、冰、低溫離心機、紫外分光光度計、1mL 石英比色皿、可調式移液器和蒸餾水。

試劑組成和配制：

試劑一：液體 50 mL×1 瓶，4℃保存。

試劑二：液體 35 mL×1 瓶，4℃保存。

試劑三：粉劑×1 瓶（棕色），4℃保存。臨用前加入 5mL 蒸餾水充分溶解。

試劑四：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加入 5mL 蒸餾水充分溶解。

粗酶液提取：

1. 按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10的比例（建議稱取約0.1g 組織，加入1mL 試劑一）進行冰浴勻漿。8000g，4℃離心 10min，取上清置冰上待測。

2. 細菌、真菌：按照細胞數量（10⁴個）：試劑一體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議

500萬細胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間 3min）；8000g 4℃離心 20min，取上清液置冰上混勻待測。

3. 血清等液體：直接測定。

DHAR 測定操作：

1. 分光光度計預熱30min，調節波長到265nm，蒸餾水調零。

2. 試劑二在25℃水浴鍋中預熱 30 min。

3. 在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、100μL試劑三、100μL試劑四和700μL試劑二，迅速混勻后于265nm比色，記錄30s和150s的吸光值 A1和A2，△A=A2-A1。

注意事項：

臨用前配制的試劑未使用完的 4℃保存，3天內使用完。