研究細胞周期
上海滬峰是由留學美國多年的資深學者創辦的一家*企業,與中國農業大學、華中農業大學、哈爾濱獸醫研究所等多家高校及生物技術研究機構建立了合作關系。公司以開發的動物疾病診斷試劑、食品安全檢測試劑、人體疾病診斷試劑、環境監測試劑、新型酶制劑、微生物制劑、蛋白質產品、核苷酸產品、綠色水產藥品、小分子抗原抗體、基因重組抗原抗體等生物化學制品為主,以*的化企業經營理念、雄厚的研發實力、規范化的生產標準、健全的銷售網絡、完善的技術服務體系和廣闊的國內外合作網絡服務于,致力于生物制劑在的產業化。
Premo™ FUCCI Cell Cycle Sensor是基于兩個細胞周期調控蛋白geminin和Cdt1,它們分別與綠色和紅色熒光蛋白相融合。Cdt1和geminin蛋白的降解是時間上調控的,這樣G1期只存在Cdt1,G1/S期存在兩種蛋白,而S、G2和M期只存在geminin。因此,細胞核的熒光就從紅色(G1)變成綠色(S、G2、M),為監控細胞周期進程提供了一種簡單的方法。
FUCCI系統是基于BacMam 2.0技術,它利用桿狀病毒來實現哺乳動物細胞的轉導和瞬時表達。BacMam 2.0大大提高了這種基因導入平臺的效率和實用性。過去與BacMam 1.0不兼容的細胞類型(神經元),或轉導效果不佳(一些干細胞、CHO)的細胞類型,現在也能通過簡單的一步過程定量轉導。BacMam 2.0融合了新元件,大大增強了轉導效率和表達水平,故性能改善。
Premo™ FUCCI Cell Cycle Sensor實現了細胞周期進程和細胞分裂的活細胞成像,它也與固定和透化處理兼容。這種細胞周期傳感器是即用型的,操作過程也很簡單——只需將Premo™ FUCCI試劑加入您的細胞,孵育過夜,并利用熒光顯微鏡或流式細胞儀觀察即可。
追蹤DNA合成
Click-iT® EdU assay則是我們常用的BrdU分析的替代。在DNA合成過程中,核苷類似物EdU(5-乙炔-2’-脫氧尿苷)摻入新生的DNA鏈中。EdU不是通過抗體檢測,而是基于一個click反應——銅催化的疊氮化物和炔烴之間的共價反應。EdU核苷中含有炔烴,而Alexa Fluor或Pacific Blue熒光基團上含有疊氮化物。利用成像技術、流式細胞術或高內涵分析即可判定群體中S期細胞的比例。
Click-iT® EdU標記的一個主要優勢在于熒光疊氮化物(分子量<~1,000)的體積遠小于BrdU抗體(分子量~150,000),這樣EdU可在溫和條件下摻入,保留了抗原完整性,從而實現了下游的抗體分析。與BrdU檢測需要苛刻條件不同,Click-iT®檢測試劑只需要標準的固定和透化即可。
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