間型假絲酵母是Candida屬的微生物，原產地為中國。白色至奶油色的奶油樣菌落，營養體細胞出芽生殖，有簡單至復雜的假菌絲，無有性生殖。主要用途為研究，具體用途為近海酵母。

一、菌種簡介

平臺編號：Bio-06219

提供形式：凍干物

拉丁屬名：Candida Intermedia

中文譯名：間型假絲酵母

拉丁學名：Candida intermedia

保藏人：鐘耀明

直接來源國家：中國

保藏時間：12/1/1958

生物危害：四類

模式菌株：非模式菌株

菌株用途：色氨酸；尿酸酶

培養溫度：25-28℃

培養基：0013    

分離源：柿子

采集國家：中國

用途：色氨酸；尿酸酶

注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產品信息以出庫為準）

二、微生物培養方法

1、平板劃線分離法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環圈在平板培養基表面，通過分區劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞，經培養后生長繁殖成單菌落。

2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的表面進行培養，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個菌落。

上述兩種方法雖然都可以實現觀察菌落特征的目的，但平板劃線分離法不能對菌落計數，而稀釋涂布平板法培養過程復雜，對平板的要求比較高，可參照以下步驟：

a、制備平板培養基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養基加熱溶化并冷卻至65℃，向氯化鈉蔗糖瓊脂培養基中加入克林霉素溶液3～5ml并混合均勻，然后取20ml混合均勻的培養基溶液倒入培養皿，輕輕搖動培養皿，使培養基溶液均勻分布在培養皿底部，待培養基溶液凝固后即得平板培養基。

b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g，放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中，振搖15～20min混合均勻，用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻，制成活性污泥混合液。

c、培養基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml，滴在平板培養基表面的位置，用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展，使之分布均勻。

三、實驗內容

1、稱量→溶化→調pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查

2、干熱滅菌：裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物

3、高壓蒸汽滅菌：加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查

4、過濾除菌：組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌

四、活化步驟

凍干粉活化，將菌粉甩至底部，將尖頭一側用酒精消毒后敲開，取0.2-0.3ml溶解液加入至菌種管中，輕輕彈至菌粉混合均勻，用無菌吸頭全部吸出溶解液，全部接種至2支斜面上培養。注意真空菌種管一旦敲開里面的凍干粉就必須全部被用掉，留著也沒用。如果有不明白之處，應先與我司聯系，避免不必要的損失。

五、菌種培養注意事項

1、微生物菌種應保存于低溫、清潔和干燥的地方，室溫放置時間過長會導致菌種衰退；

2、菌種操作在無菌條件下進行，接種完畢應該滅菌再做丟棄處理；

3、斜面菌種和穿刺菌種保存時間通常為 3-6 個月，應根據菌種狀況及時結轉；凍干粉保存時間通常是 2-25 年；甘油菌保存時間為 2-5 年;

4、凍干首-次活化，干粉要全部用完，不能保留。用0.2-0.5m1的培養液或者無菌水溶解,接種在1-2個平板上，因凍干菌種處于休眠狀態，請勿接種多個平板，以免因接種量不足而導致復蘇不成功。

5、如果有不明白之處，應先與我中心聯系，避免不必要的損失。

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