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本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本。用純化的試劑抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入它，再與HRP標記的抗體結合，形成抗體抗原酶標抗體復合物，經過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，通過標準曲線計算樣品的濃度。
試劑的使用常識：
（1）試劑切忌與手接觸（有些試劑有強腐蝕性、等特性）。
（2）要用潔凈的藥勺，量筒或滴管取用試劑，絕不允許用同一種工具同時連續取用多種試劑。取完一種試劑后，應將工具洗凈（藥勺要擦干）后，才可取用另一種試劑。
（3）試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊，不可放錯瓶蓋和滴管，絕不允許張冠李戴，用完后請及時將瓶放回原處，以免遺忘，帶來不便。
（4）已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內（怕產生原試劑的再次污染）。
標本要求：
1．小鼠小膠質細胞標志物(Iba-1)ELISA試劑盒不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
2．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
需要而未提供的試劑和器材：
37℃恒溫箱
標準規格酶標儀
精密移液器及一次性吸頭
蒸餾水
一次性試管
吸水紙
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