1. 抽吸法,也叫移液法,是通過固定磁珠、轉(zhuǎn)移液體來實(shí)現(xiàn)核酸的提取,一般通過操作系統(tǒng)控制機(jī)械臂來實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)移。提取過程如下:
1) 裂解:在樣品中加入裂解液,通過機(jī)械運(yùn)動及加熱實(shí)現(xiàn)反應(yīng)液的混勻及充分反應(yīng),細(xì)胞裂解,釋放核酸。
2) 吸附:在樣品裂解液中加入磁珠,充分混勻,利用磁珠在高鹽低PH值下對核酸具有很強(qiáng)親和力的特點(diǎn),吸附核酸,在外加磁場作用下,磁珠與溶液分離,利用吸頭將液體移出棄至廢液槽,吸頭棄掉。
3) 洗滌:撤去外加磁場,換用新吸頭加入洗滌緩沖液,充分混勻,去除雜質(zhì),在外加磁場作用下,將液體移出。
4) 洗脫:撤去外加磁場,換用新吸頭加入洗脫緩沖液,充分混勻,結(jié)合的核酸即與磁珠分離,從而得到純化的核酸。
2. 磁棒法
磁棒法是通過固定液體,轉(zhuǎn)移磁珠來實(shí)現(xiàn)核酸的分離,原理和過程與抽吸法的一樣,不同的是磁珠和液體分離的方式。磁棒法是通過磁棒對磁珠的吸附將磁珠從廢液中分離開,放入下一步的液體中,實(shí)現(xiàn)核酸的提取。
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