在做各種樣品(藥品、醫療器械、化妝品、保健食品)的微生物檢驗中,經常會看到質量標準中會涉及CFU/g或CFU/ml。還有一些標準中單位是個/g或者個/ml。這些到底有什么差別,我們要從CFU的基本定義開始。
CFU:A colony-forming unit(CFU,cfu,CFu)is a unit used in microbiology to estimate the number of viable bacteria or fungal cells in a sample.
翻譯過來就是:菌落形成單位是指微生物學中用于估算樣品中活的細菌或者真菌數量的單位。
直觀來說,小小的一個微生物不是肉眼可見的,必須借助高倍顯微鏡甚至染色后才能清楚觀察到。CFU是通過平板培養基上肉眼可見的菌落數來反推樣品中微生物數量的一種方式,這期間發生了分散、稀釋、培養等等過程。
首先,CFU是菌落形成單位,數據不是直接反映樣品中的微生物數量。是一種認可的估算。估算成功的前提是平板涂布或者接種之前微生物活細胞分散均勻。而一些鏈球菌、球菌等天生就不能單細胞分散均勻。另外一個因素是稀釋倍數合理,有些樣品的微生物含量很高,要想計數必須梯度稀釋很多次,后CFU區間落在30-300之間更有效。太多太少都不合適。
其次,能夠在平板上生長出來的活的微生物才會形成CFU。理論上,分散均勻的情況下,一個活細胞形成1CFU。在實際操作中,渦旋振蕩進行混勻就會出現很多情況。微生物是分散程度更好了,但是有一些被振死了。 另外,微生物終能在平板培養基上形成菌落還與培養基類型、培養溫度及時間、接種方式、潛在微生物類型有關系。
總而言之,CFU是一種估算方法。當出現CFU時,就代表了已經選擇了這種估算方式,不同的單位也代表了過程的前后。
后,來說說CFU的現實意義。舉例來說,定量菌種的菌種數量如果標示的是“CFU”,也就代表這種定量菌種也是用培養基法來計數的。如果定量菌種是用流式細胞儀等其他方式計數,標示“個”更為合理。
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