購買ELISA試劑盒時,很多客戶們會比較關心“質量過關嗎”“壽命長久嗎”“精密度夠要求嗎”等相關問題。ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預實驗中進行彼此相抗的滴定,包括在適當范圍內的標準品的系列稀釋,按試劑說明書常規提供的范圍進行操作。這些都是一些基礎知識,今天上海勁馬實驗設備有限公司帶您一起來看ELISA試劑盒操作技術常識分享:
試劑盒的配制:對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書,注意每批的細節。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據每批說明書中的細節,將凍干的細胞因子復溶。
一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。可利用標準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統可在一定范圍內提高靈敏度。為了優化靈敏度,建議孵育標準品和標本。若使用過氧化物酶作為顯色系統,應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物ELISA試劑盒酶的活性。
注意事項
1.濃縮洗滌液出現結晶后,請于37℃孵育15分鐘
2.使用前應將盒內各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
3.保存于2-8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內標示。
什么是ELISA試劑盒的回收率?是反應待測物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標液1PPM,就是1毫克/升,而作出標準數據為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關系,說明方法的準確度。比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20 mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯標準樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機氯為2.98mg/L,則認為回收率為98%。
對于定量檢測來說,主要還是一個準確度的驗證。不過我看到別人寫的內容比我自己想說的要好,所以就貼上去了。相對回收率可能會高于100%的,如果只是說“損失程度”,其實是不準確的。應該說,回收率越接近100%,說明這個試劑盒的準確度越高。
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