Western抗體洗脫液中文版說明書

產品簡介：

Western抗體洗脫液(Stripping buffer)又稱膜再生液或Western一抗二抗去除液，用于Western中轉移了蛋白的膜的重復利用。在Western中完成了一抗二抗結合和后續的化學發光檢測后，有時還需要檢測GAPDH、β-actin等表達量相對穩定的管家蛋白或其它蛋白作為參照。Stripping buffer可以洗脫一抗二抗，非常方便地重新利用使用過的膜，檢測其它蛋白。 Stripping buffer多次重復使用同一張膜，會導致蛋白信號的減弱不宜重復利用膜，一般可以利用2～3次。

MBWestern Stripping buffer 主要依靠堿性來解除一抗二抗的結合，同時又不會導致轉移到膜上的蛋白的損失， 適用于Western化學發光檢測后的蛋白膜的重復利用，尤其適用于PVDF膜，其次為硝酸纖維素膜。非化學發光試劑進行的Western檢測(如DAB，NBT/BCIP)不適用于本試劑。

產品組成：

自備材料：

1、 蒸餾水

2、 搖床

3、 (可選)濾紙

4、 Western封閉液

操作步驟(僅供參考)：

1、在膜完成Western化學發光檢測后，蒸餾水中漂洗5min。

2、棄蒸餾水，加入Western Stripping buffer，*覆蓋住膜。

3、搖床上漂洗5min。

4、棄液，盡量把Western Stripping buffer去除干凈，必要情況下，可以用濾紙吸干。

5、加入蒸餾水振蕩漂洗2～3次，每次漂洗3～5min。

6、入封閉液進行封閉后(推薦酪氨酸或脫脂奶粉作為封閉液)，進行Western后續操作。

注意事項：

使用辣根過氧化物酶標記的抗體時，封閉液必須使用5%脫脂奶粉配制。使用堿性磷酸酯酶標記的抗體時，封閉液必須使用酪蛋白(casein)配制。

Western Stripping buffer(堿性)特別適用于PVDF膜的再生，硝酸纖維素膜的再生效果不如PVDF膜。

Western Stripping buffer(堿性)適用于ECL等類似的化學發光液的檢測后的一抗二抗洗脫。非化學發光試劑進行的Western檢測(如DAB，NBT/BCIP)不適用于本試劑。

Western Stripping buffer(堿性)有輕微腐蝕性，使用時請注意防護。

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

有效期： 12個月有效。