冰凍切片淀粉樣蛋白（AMYLOID）硫磺素S（thioflavine S）熒光染色試劑盒

產(chǎn)品說明書（中文版）

主要用途

 冰凍切片淀粉樣蛋白（AMYLOID）硫磺素S（thioflavine S）熒光染色試劑是一種旨在使用硫磺素S染色技術(shù)，與淀粉樣蛋白結(jié)合，來分析存檔中的冰凍組織切片中蘋果綠熒光現(xiàn)象的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。主要適用于冰凍組織切片的淀粉樣蛋白檢測。廣泛用于淀粉樣蛋白樣疾病的病理生理的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，熒光清晰。

技術(shù)背景

淀粉樣蛋白（AMYLOID）是一種同質(zhì)性、嗜伊紅性（eosinophilic）、不溶性的纖維蛋白（fibrous protein）聚合體，具有共同的β交叉折疊層（β sheet）組織結(jié)構(gòu)特征，沉積在細(xì)胞外。蛋白質(zhì)錯誤折疊（misfolding），且異常自我聚集將導(dǎo)致淀粉樣變性（amyloidosis），細(xì)胞毒纖維沉積，產(chǎn)生組織損傷，進(jìn)而引起23種不同淀粉樣蛋白綜合癥，超過400種疾病，包括阿茨漢姆癥、巴金森氏癥、II型糖尿病、白內(nèi)障、朊病毒疾病等。淀粉樣蛋白斑（amyloid plaque）和神經(jīng)纖維纏結(jié)（neurofibrillary tangles；NFT）是淀粉樣蛋白綜合征的病理性特征。硫磺素S（thioflavine S），苯并噻唑（benzothiazole）衍生物，含有至少6種成分，通過脫氫硫甲苯胺（dehydrothiotoluidine）與磺酸（sulfonic acid）的甲基化而成，是zui常用的淀粉樣蛋白熒光探針。較之硫磺素T（thioflavine T），硫磺素S更為特異，且結(jié)合能力強(qiáng)。一旦與淀粉樣蛋白纖維結(jié)合，在熒光顯微鏡下（激發(fā)波長470nm，散發(fā)波長510nm），呈現(xiàn)蘋果綠熒光。

產(chǎn)品內(nèi)容

 清理液（Reagent A）  100毫升 固著液（Reagent B）   10毫升 氧化液（Reagent C）   10毫升 去干擾液（Reagent D）   10毫升 染色液（Reagent E）   10毫升 強(qiáng)化液（Reagent F）   20毫升 穩(wěn)定液（Reagent G）   10毫升

產(chǎn)品說明書    1份

保存方式

保存GENMED染色液（Reagent E）在-20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；GENMED染色液（Reagent E），避免光照；有效保證3月

用戶自備

（共聚焦）熒光顯微鏡：用于組織細(xì)胞染色后觀察分析

實(shí)驗(yàn)步驟

• 樣本固著處理

• 取出10片待測的冰凍組織切片 
• 小心加上200微升GENMED清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 室溫下孵育2分鐘
• 小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）
• 小心加上200微升GENMED固著液（Reagent B）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 室溫下孵育5分鐘
• 小心移去切片上的GENMED固著液（Reagent B）
• 小心加上200微升GENMED清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 室溫下孵育2分鐘
• 小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）

二、樣本染色處理

• 小心加上200微升GENMED氧化液（Reagent C），鋪滿整個切片樣品表面
• 室溫下孵育5分鐘 
• 小心移去切片上的GENMED氧化液（Reagent C）
• 小心加上200微升GENMED清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 室溫下孵育1分鐘
• 小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）
• 小心加上200微升GENMED去干擾液（Reagent D），鋪滿整個切片樣品表面
• 室溫下孵育5分鐘 
• 小心移去切片上的GENMED去干擾液（Reagent D）
• 小心加上200微升GENMED清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 室溫下孵育1分鐘
• 小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）
• 小心加上200微升GENMED染色液（Reagent E），鋪滿整個切片樣品表面
• 室溫下孵育8分鐘，避免光照
• 小心移去切片上的GENMED染色液（Reagent E）
• 小心加上200微升GENMED強(qiáng)化液（Reagent F），鋪滿整個切片樣品表面
• 室溫下孵育1分鐘 
• 小心移去切片上的GENMED強(qiáng)化液（Reagent F）
• 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟16至18一次
• 小心加上200微升GENMED清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 室溫下孵育1分鐘
• 小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）
• 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟20至22二次
• 小心加上200微升GENMED穩(wěn)定液（Reagent G），鋪滿整個切片樣品表面
• 在4℃冰箱里孵育30分鐘 
• 小心移去切片上的GENMED穩(wěn)定液（Reagent G）
• 小心加上200微升GENMED清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 室溫下孵育1分鐘
• 小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）
• 封片
• 即刻在（共聚焦）熒光顯微鏡下（激發(fā)波長470nm，散發(fā)波長510nm）觀察：

淀粉樣蛋白：呈現(xiàn)蘋果綠熒光

注意事項(xiàng)

• 本產(chǎn)品為50次操作
• 操作時，須帶手套
• 本產(chǎn)品友好使用于雙重染色或重疊染色，即首先進(jìn)行常規(guī)免疫熒光染色，然后進(jìn)行硫磺素S染色
• 試劑溶液在樣品表面時，避免有氣泡存在，同時確保鋪滿樣品表面
• 組織細(xì)胞染色完成后，即刻進(jìn)行熒光顯微鏡觀察 
• 用戶可以使用DAPI濾波器波長進(jìn)行觀察
• 本公司提供系列淀粉樣蛋白染色試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰