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兔腎素(Renin)ELISA檢測試劑盒現貨價格

來源:上海酶遠生物科技有限公司    2017年07月02日 16:56  

兔腎素(Renin)ELISA檢測試劑盒現貨價格

參數規格:

檢測種屬:大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬

產品保存:2~8℃、有效期6個月

產品詢價:您可以通過、郵件、傳真或在線客戶方式詢價。

Elisa試劑盒應用:準確定性定量分析(但Elisa試劑盒只能供科研使用,不能作為臨床診斷使用)

ELISA酶免試劑盒四大特性:

1.特異性強:不與其它細胞因子反應。

2.重復性好:板內、板間變異系數均小于10%。

3.穩定性高:實驗效果很穩定。

4.超靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品,稀釋度和樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。

主要優點:

一、、靈敏、特異的抗體;

二、穩定的重復性和可靠性;

三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;

四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;

五、zui大限度的節省實驗經費。

兔腎素(Renin)ELISA檢測試劑盒現貨價格

操作流程:

1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;

2. 加樣(標準品及樣本)100μL,37°C孵育1小時;

3. 吸棄,加檢測溶液A100μL,37°C孵育1小時;

4. 洗板3次;

5. 加檢測溶液B100μL,37°C孵育30分鐘;

6. 洗板5次;

7. 加TMB底物90μL,37°C孵育15-25分鐘;

8. 加終止液50μL,立即450nm讀數。

工作原理:

將轉化生長因子β2 (TGFb2)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的轉化生長因子β2 (TGFb2)與連接于固相載體上的抗體結合,然后加入生物素化的轉化生長因子β2 (TGFb2)抗體,將未結合的生物素化抗體洗凈后,加入HRP標記的親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的轉化生長因子β2 (TGFb2)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。

兔腎素(Renin)ELISA檢測試劑盒現貨價格

ELISA標準操作及技術服務的常見問題分析:

.ELISA 標準操作要點

的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA 檢測結果準確可靠的必要條件。ELISA 中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應為新鮮的和高質量的本公司要求使用的純化水電導率小于1.5μs/cm。

1. 標本的采取和保存

大部分ELISA 檢測均以血清為標本。血清標本可按常規方法采集,應注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,以HRP 為標記的ELISA 測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應。一般說來,在5 天內測定的血清標本可放置于4℃,標本在冰箱中保存時間過長導致血清IgG 聚合,使間接法的試劑本底加深。超過一周測定的需-20℃保存。凍結血清融解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻并避免產生氣泡。混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。反復凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應注意無菌操作,也可加入適當防腐劑。抗凝不*的標本因纖維蛋白原的干擾而造成假陽性,建議盡量不用抗凝血尤其是肝素抗凝劑。

2.加樣

加樣時應將所加物加在ELISA 板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出。

3.保溫

在建立ELISA 方法作反應動力學研究時,實驗表明,兩次抗原抗體反應一般在37℃經

1-2 小時,產物的生成可達。為避免蒸發,板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,反應板不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確。由于公司的試劑盒溫育是在空氣浴中完成,采用水浴會造成值偏高或花板。另外溫育中還有邊緣效應,邊上的值會偏高,建議為了客觀的判斷結果,將質控放在非邊緣位置。

4.洗滌

洗滌在ELISA 過程中雖不是一個反應步驟,但卻決定著實驗的成敗。ELSIA 就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質,以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的,而在洗滌時應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來。可以說在ELISA 操作中,洗滌是zui主要的關鍵技術,應引起操作者的高度重視,操作者應嚴格按要求洗滌,不得馬虎。

洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質的結合是疏水性的,非離子型洗滌劑既含疏水基團,也含親水基團,其疏水基團與蛋白質的疏水基團借疏水鍵結合,從而削弱蛋白質與固相載體的結合,并借助于親水基團和水分子的結合作用,使蛋白質回復到水溶液狀態,從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20,其濃度可在0.05%-0.2%之間,高于0.2%時,可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。

洗板時注意各種試劑盒的洗液不要混用。如果洗液需要稀釋,應按要求稀釋,所用的水電導率在1.5us/cm 之下,洗液如果結晶應待其融解后配制。保證洗板浸泡時間為40 秒左右,孔內液體被洗板機吸收得越干凈洗滌效果更好,手工洗板防止洗液在孔內形成氣泡。

5. 顯色和比色

TMB 經HRP 作用后,約40 分鐘顯色達,隨即逐漸減弱,至2 小時后即可*消退至無色。TMB 的終止液有多種,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應終止。這類終止劑尚能使藍色維持較長時間(12-24 小時)不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外,各類酸性終止液則會使藍色轉變成黃色,此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。酶標比色儀簡稱酶標儀,通常指于測讀ELISA 結果吸光度的光度計。酶標儀的主要性能指標有:測讀速度、讀數的準確性、重復性、度和可測范圍、線性等等。優良的酶標儀的讀數一般可到0.001,準確性為±1%,重復性達0.5%。酶標儀不應安置在陽光或強光照射下,操作時室溫宜在15~30℃,使用前先預熱儀器15-30 分鐘,測讀結果更穩定。

測讀A 值時,要選用產物的敏感吸收峰,如OPD 用492nm 波長。有的酶標儀可用雙波長式測讀,即每孔先后測讀兩次,*次在zui適波長(W1),第二次在不敏感波長(W2),兩次測定間不 移動ELISA 板的位置,zui終測得的A 值為兩者之差(W1-W2)。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

訂購說明:

1. 明確檢測何種蛋白;

2. 明確編碼該蛋白的基因與其它哪些物種同源性;

3. 尋找檢測這些物種蛋白的試劑盒;

4. 咨詢上海酶遠使用的抗體類型;

5. 做出自己的判斷該買哪個試劑盒。

 

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