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細胞名稱：calu-6(hlf)人退行性癌細胞ATCC

細胞代次：P4

細胞規格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運輸費）

細胞凍存：無血清凍存液

細胞傳代：第一次建議1:2

1、您收到細胞后，請按照以下方法進行操作：

取出25cm2培養瓶，75%酒精擦拭培養瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中靜置3-4小時以穩定細胞狀態，然后換用新鮮*培養液繼續培養或進行傳代。

2、細胞傳代：

1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入*培養液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；

3）棄上清，沉淀細胞用12ml*培養基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，zui后放入37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；

4）待細胞*貼壁后，觀察培養結果，之后進行換液培養或傳代。

3、細胞凍存：

1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入*培養液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；

3）用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，并放置于凍存管中；

4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。

4、細胞復蘇：

1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；

2）將凍存管中的細胞移至含5ml*培養基的15ml離心管中， 1000rpm離心5min；

3）棄上清，沉淀用5ml*培養基重懸，接種25cm2培養瓶，于37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；

4）第二天，換用新鮮*培養基繼續培養。

原代細胞與細胞系有什么區別？細胞培養物來源于原代外植體或分散的細胞懸液。通常在這樣的培養物中細胞增殖形成匯合地單層細胞或密集地細胞懸液。根據傳統定義，*次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細胞生命周期有限，在有限的生命周期內需掌握好細胞zui大的生長空間，以保持細胞群中基因型和表型的*性。細胞系是不斷生長，分化的細胞群，因其經過遺傳改造，致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細胞系用于醫療或科研。實際上，連續細胞系可以用大量次培養基培養，隨著代數的增加細胞的基因型和表型都有可能發生改變。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。

1、倍增和代數有什么區別？倍增是培養物中細胞總數加倍，通常是指細胞指數或對數生長期。代數是指細胞群從培養瓶中移出，傳代培養過程的次數，傳代培養的目的是使細胞處于低密度以刺激其進一步生長。

2、接收到的凍存細胞該如何處理？收到包裝箱后，立即將凍存細胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快以避免升溫。不要將細胞儲存在-80℃，這樣會對細胞造成不可挽回的傷害。

3、有多少經驗才能開始正常人類細胞培養？推薦有經驗者在無菌環境下用層流凈化罩工作，如果有經驗的話對其它細胞類型也是很有利的。如果你是細胞培養的初學者或打算建立細胞培養實驗室，我們會為你提供幫助。請的細胞培養專家。

售后服務告知書

1）細胞出現問題，可重發的情況有哪些？判定標準是什么？

1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、瓶身破損、培養液嚴重漏液等，重發；

2. 細胞污染問題，請在收到產品48小時內，給我們提出真實的實驗結果，核實后重發；

3. 常溫發貨的細胞靜置24小時后，干冰凍存發貨的細胞復蘇后24小時后，絕大多數細胞未存活，（需提供真實清晰的細胞狀態照片），重發；

4. 干冰凍存發貨的細胞復蘇后24小時后或常溫發貨的細胞靜置4小時候并且未開封，出現污染，重發；

5. 細胞活性問題，請在收到產品7天內給我們提出真實的實驗結果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，核實后予重發；

6. 細胞收到當天以及第2,3天請拍照，3天未告知的，視為產品合格。4-7天內出現問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現問題時照片以及細胞相關操作的詳細步驟的，并跟技術人員溝通的，由技術人員判定為我方責任的，重發。技術人員判定為雙方承擔責任的由雙方進行協商處理或者按合同價的50%收費重發。

二）細胞出現問題，不予以重發的情況有哪些？

1. 客戶造成細胞污染，不重發；

2. 客戶不正確操作致細胞狀態不好，不重發；

3. 非本庫推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好，不重發；

4. 細胞狀態不好，未提供細胞培養前3天照片的，不重發；

5. 細胞培養時經其它處理的，不重發；

6. 細胞收到2天內，未告知，不重發；

7. 視具體情況而定。

YS3503CLM9小鼠HGPRT基因缺陷型骨肉瘤細胞

YS3504C Kasumi-1人急性原粒細胞白血病細胞

YS3505C WEHI164鼠纖維肉瘤細胞

YS3506C DMS153人小細胞肺癌

YS3507C Hi-fiveBTI-TN-5B1-4昆蟲細胞

YS3508C HULEC-5a人肺微血管內皮細胞2018年ATCC新引進

YS3509C MARC-145[Marc-145;Marc145;Marc145]非洲綠猴胚胎腎細胞

YS3510C SCC-25[SCC25;SCC25]人舌磷癌細胞

YS3511C NCI-H2228[H2228;H-2228]人肺癌細胞

YS3512C MV-4-11人髓性單核細胞白血病細胞

YS3513C A549/Tax人肺腺癌耐藥性細胞

YS3514C 143B人胸腺激酶缺陷細胞人骨肉瘤細胞

YS3515C 293T人腎上皮細胞

YS3516C 3T3-SWISS小鼠胚胎成纖維細胞

YS3517C 5-8F人高轉移鼻咽癌細胞系

YS3518C 769-P-eGFP人腎細胞腺癌細胞穩轉綠色熒光

YS3519C 786-O人腎透明細胞腺癌細胞

YS3520C 786-O人腎透明細胞癌細胞

YS3521C 786-O穩轉mCherry+Luciferase人腎透明細胞腺癌細胞穩轉紅色熒光+luc

YS3522C 8505C人甲狀腺未分化癌細胞系

YS3523C A172人腦膠質瘤細胞

YS3524C A20小鼠B細胞淋巴瘤細胞

YS3525C A2780/taxol人卵巢癌細胞耐藥株

YS3526C A549/taxol人肺癌細胞耐藥株

YS3527C A549-GFP人肺癌細胞帶綠色熒光

YS3528C A704人腎癌細胞系

YS3529C ASMC小鼠氣道平滑肌細胞

YS3530C AsPC-1（panc-1）人轉移胰腺腺癌細胞

YS3531C AV3人乳頭狀瘤病毒相關性宮頸腺癌細胞

YS3532C "B16F10小鼠黑色素瘤細胞 "

YS3533C B95-8EBVEBV轉化的絨猴白細胞

YS3534C BALB/C3T3小鼠胚胎成纖維細胞

YS3535C B-cpap人甲狀腺乳頭狀癌細胞

YS3536C BE3人食管癌細胞

YS3537C "BEAS-2B人支氣管上皮細胞 "

YS3538C BEL-100人肝癌細胞

YS3539C Bel7402/fu人肝癌細胞5-FU耐藥株

YS3540C BGC823人胃癌細胞

YS3541C BON-1人胰腺神經內分泌瘤細胞

YS3542C C17.2小鼠神經干細胞系

YS3543C BV173人外周血B細胞

YS3544C caco-2人克隆結腸腺癌細胞

YS3545C calu-6(hlf)人退行性癌細胞

YS3546C case-17人宮頸腺癌細胞

YS3547C CCRF-CEM人急性淋巴細胞白血病T淋巴細胞

YS3548C CCRF-CEM（sup-b15）人急性淋巴細胞白血病細胞

YS3549C CCRF-SB人急性T淋巴細胞白血病細胞

YS3550C cgm1人EB病毒轉化的B細胞

YS3551C ChangLiver（sk-n-sh）人HeLa[ChangLiver]細胞

YS3552C CHO-DHFR中國倉鼠卵巢細胞

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