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細胞名稱：143B人骨肉瘤細胞ATCC

細胞代次：P4

細胞規格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運輸費）

細胞凍存：無血清凍存液

細胞傳代：第一次建議1:2

細胞收到后處理

培養至良好狀態后灌滿培養液并封好瓶口是運輸細胞的最好辦法。收到細胞用75%酒精噴灑整個細胞瓶，消毒后放到超凈臺內嚴格無菌操作，將細胞瓶放入37℃、5%CO₂的培養箱中靜置3-4小時以穩定細胞狀態后再做處理。顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照保存（最好40x,100x,200x各一張），前三天照片是重要售后依據，不提供照片默認收到狀態良好。（注意密封培養瓶放入培養箱時要將蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶的培養基，另外一瓶用自己配的培養基，以便進行對比培養）

培養時的注意技巧

1.換液前將培養瓶豎在培養箱靜置1小時左右，輕輕吸掉3ml左右培養基，然后加入3ml的新鮮培養基，混勻后放入培養箱中培養。

2.如果細胞密度比較稀，培養基沒有明顯變化，可以加入500ul的FBS混勻后，豎著培養。

3.傳代時，先按照換液步驟處理，吸掉3ml左右培養基后，加入10ml的新鮮培養基，混勻后分2個T25培養瓶培養。

4.培養一周左右可以離心一次，以去除一些死細胞。

5.該細胞比較脆弱，培養過程中不要頻繁拿出來觀察，以免影響細胞的生長。

6.該細胞的生長環境比較敏感，需使用較好的血清培養。

7.建議使用未TC處理的瓶或者皿培養。

訂購建議：

為避免收到細胞后離心處理，推薦使用15ml離心管發貨，到貨后直接分裝到2個T25培養瓶即可。

注意事項：有些細胞比較特殊，如貼壁不牢，在運輸過程中發生容易細胞脫落，這是正常現象。請將培養瓶所有培養液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過渡培養（后期對比培養），沉淀加入消化液1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml培養基終止反應。再離心，棄上清，加1-2ml培養基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代（兩個T25），補充新的培養基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO₂細胞培養箱中培養。

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