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深圳市艾瑞斯儀器有限公司
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產品介紹
一、口蹄疫O型抗體檢測試劑盒
通用名：口蹄疫病毒O型IgG抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）
英文名：Diagnostic Kit for Antibodies to Porcine foot and mouth disease virus (ELISA)
二、包裝規格 96T×1/盒、96T×2/盒、96T*5/盒
三、預期用途 口蹄疫是由口蹄疫病毒（FMDV）感染引起的偶蹄動物共患的急性、熱性、接觸性傳染病。在豬的預防免疫工作中，最值得關注的就是強化免疫的接種時機問題。在過高的抗體水平進行免疫，過高的抗體水平還會中和疫苗，影響疫苗的免疫效果，導致免疫失敗；在較低的抗體水平進行免疫，又會出現抗體保護真空期，威脅豬的健康。
豬口蹄疫O型抗體試劑盒用于檢測豬血清、血漿中豬口蹄疫病毒O型抗體，可用于豬口蹄疫病毒O型疫苗免疫效果評價。
四、口蹄疫O型抗體檢測試劑盒原理
本試劑盒系由預包被豬口蹄疫病毒O型（OZK/93株+OS/99株）VP1表位多肽抗原的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成，應用酶聯免疫法（ELISA）原理檢測豬血清、血漿樣本中豬口蹄疫病毒O型抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本，經溫育后若樣品中含有豬口蹄疫病毒O型抗體，則將與酶標板上抗原結合，經洗滌除去未結合的其他成分后；再加入酶標記物，與酶標板上抗原抗體復合物發生特異性結合；再經洗滌除去未結合的酶標記物，在孔中加TMB底物液，與酶反應形成藍色產物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關；加入終止液終止反應后，產物變為黃色；用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值，即可知樣品是否含有豬口蹄疫病毒O型抗體。
五、口蹄疫O型抗體試劑盒組成
酶標板、酶標記物、樣品稀釋液、濃縮洗滌液、底物液A、底物液B、陽性對照、陰性對照
六、儲存及有效期
于2～8℃避光保存，有效期為12個月。
包被板開封后請于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限為2個月。
七、適用儀器 含450nm、630nm波長的酶標儀，37℃恒溫設備，可調微量移液器。
【樣品準備】
1.取動物全血按常規方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品1周內可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存。
2.用工作洗滌液將待檢牛、羊血清先按32倍稀釋（如5μl血清加入155μl工作洗滌液中，混勻），待檢豬血清按16倍稀釋（如5μl血清加入75μl洗滌液中，混勻），陰、陽性對照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液(如19份蒸餾水或去離子水+1份濃縮洗滌液)。
【檢驗方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復至室溫。
2.取所需用量酶標板條，設陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。
3.陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照50μl，樣品孔每孔先加入工作洗滌液25μl，再加入稀釋后的樣品25μl；最后都加入抗原液50μl。
注：加入抗原后牛、羊樣本稀釋比例相當于1:128，豬樣本稀釋比例相當于1:64。
4.震蕩混勻10秒，蓋好蓋板膜，置37℃（推薦水浴）避光反應30分鐘。
5.甩去孔內液體，每孔加350μl工作洗滌液，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次，最后一次拍干。
6.每孔加抗體工作液50μl，蓋好蓋板膜，置37℃避光反應30分鐘。
7.洗滌，同步驟5。
8.每孔加酶標記物50μl，蓋好蓋板膜，置37℃避光反應30分鐘。
9.洗滌，同步驟5。
10.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，蓋好蓋板膜，置37℃避光反應15分鐘
11.每孔加終止液50μl，混勻，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值）。
【參考值】 實驗正常的情況下，陰性對照A值≥0.8，陽性對照A值≤50%×陰性對照A值。
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