基于cIEF的蛋白等電點(diǎn)分析檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

蛋白的等電點(diǎn)與其氨基酸序列和三維結(jié)構(gòu)密切相關(guān)，特定蛋白的等電點(diǎn)是固定的，因此可以通過比較不同dànbáizhì的等電點(diǎn)來研究它們的結(jié)構(gòu)和功能差異，jīngquè測定等電點(diǎn)是生物制品電荷異質(zhì)性表征的重要一環(huán)。

基于毛細(xì)管等電聚焦（cIEF）原理進(jìn)行蛋白等電點(diǎn)分析是生物制品等電點(diǎn)檢測中zuì常使用的方法。該微分離技術(shù)的基本原理是在毛細(xì)管兩端加上直流電壓，管內(nèi)的載體兩性電解質(zhì)可以形成一定范圍的pH梯度，dànbáizhì依據(jù)其所帶電荷向陽極或陰極移動(dòng)，直到凈電荷為0的某個(gè)pH值（即等電點(diǎn)pI）時(shí)停止，zuì終dànbáizhì聚焦成很窄的區(qū)段，從而達(dá)到分離的目的，并獲得該dànbáizhì的等電點(diǎn)信息。

基于cIEF進(jìn)行蛋白等電點(diǎn)檢測，分析時(shí)間短、分辨率高、重復(fù)性好、jīngquè度高、樣本用量少，已經(jīng)成為多種氨基酸、多肽、重組蛋白、抗體及疫苗等生物制品研發(fā)與質(zhì)量控制中的關(guān)鍵技術(shù)之一。

百泰派克生物科技BTP通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證；公司參照《中華人民共和國藥典》2020年版三部通則0542/四部通則0542毛細(xì)管電泳法，根據(jù)cIEF原理，建立了針對于不同類別生物制品的蛋白等電點(diǎn)檢測平臺(tái)，可實(shí)現(xiàn)蛋白、抗體、疫苗、多肽、重組膠原蛋白等生物制品等電點(diǎn)的jīngquè測定，也可以提供完整的包含方法學(xué)建立、驗(yàn)證以及后續(xù)樣品檢測的整體服務(wù)。BTP還提供其他相關(guān)的服務(wù)，可點(diǎn)擊了解詳情。生物制品表征

實(shí)驗(yàn)儀器

• BECKMAN COULTER PA800+毛細(xì)管電泳儀

技術(shù)應(yīng)用

cIEF具有分析時(shí)間短，分辨率高、重復(fù)性好、jīngquè度高、樣本用量少等優(yōu)點(diǎn)。該方法已經(jīng)成為多種氨基酸、多肽、重組蛋白、抗體、疫苗等生物制品研發(fā)與質(zhì)量控制中的關(guān)鍵技術(shù)之一。

案例示意

實(shí)驗(yàn)過程中，將樣品與兩性電解質(zhì)及5種標(biāo)準(zhǔn)的pI Marker混合，使用毛細(xì)管電泳儀檢測，在毛細(xì)管中電泳聚焦，根據(jù)5種內(nèi)標(biāo)的保留時(shí)間，計(jì)算出供試品等電點(diǎn)。

圖1 pI marker結(jié)果

圖2 單抗樣品檢測結(jié)果

常見問答

問題1：為什么多數(shù)dànbáizhì的等電點(diǎn)是中性偏酸性？

回答：dànbáizhì是由氨基酸組成的，而大多數(shù)氨基酸等電點(diǎn)小于人體的pH（pH=7.4），故而大多數(shù)的dànbáizhì的等電點(diǎn)偏酸性，如山羊wèidànbáiméi等電點(diǎn)約為3。

問題2：有沒有等電點(diǎn)偏堿性的dànbáizhì？

回答：存在pI堿性的dànbáizhì。當(dāng)dànbáizhì中的堿性氨基酸，如zǔānsuān，jīngānsuān、賴氨酸、比列較大，會(huì)導(dǎo)致等電點(diǎn)偏堿性，如yújīngdànbái等電點(diǎn)約為12。

問題3：做等電點(diǎn)檢測，兩種檢測方法如何選擇？

回答：基于cIEF的等電點(diǎn)檢測需要樣品具有280nm的紫外吸收；不具有280nm的紫外吸收的樣品（例如膠原蛋白）進(jìn)行基于IEF的等電點(diǎn)檢測。

基于cIEF的蛋白等電點(diǎn)分析一站式服務(wù)

您只需下單-寄送樣品 百泰派克一站式服務(wù)完成：樣品處理-上機(jī)分析-數(shù)據(jù)分析-項(xiàng)目報(bào)告

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù)，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù)，對蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細(xì)胞層面上對多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù)；

2.獲國家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

基于cIEF的蛋白等電點(diǎn)分析檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹