高通量基因敲除服務(wù)檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

“敲除"相關(guān)哺乳動(dòng)物基因是研究基因功能或其作為藥物靶點(diǎn)潛力的一種重要方法，在阿爾茨海默病、癌癥、心血管疾病、炎癥或代謝疾病等神經(jīng)退行性疾病研究中都被廣泛應(yīng)用。CRISPR/Cas9是一種革命性的基因編輯技術(shù)，可以jīngquè修改基因組序列。CRISPR是細(xì)菌和古細(xì)菌中的一種免疫系統(tǒng)，能夠識(shí)別并切割入侵病毒的基因組。通過(guò)引入Cas9蛋白和相應(yīng)的向?qū)NA，CRISPR/Cas9技術(shù)可以jīngquè定位和切割特定的DNA序列，實(shí)現(xiàn)基因敲除、點(diǎn)突變和基因插入。CRISPR/Cas9介導(dǎo)的基因編輯具有巨大的臨床應(yīng)用潛力，隨著該技術(shù)的日趨成熟，其在藥物靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)和驗(yàn)證、基因功能研究、基因治療、癌癥免疫療法等眾多領(lǐng)域發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用。

CRISPR/Cas9基因敲除技術(shù)

為滿足基礎(chǔ)研究及醫(yī)藥研發(fā)的需求，科研領(lǐng)域急需獲得系列靶基因/全基因組的敲除細(xì)胞。百泰派克生物科技（BTP）采用優(yōu)化的CRISPR/Cas9系統(tǒng)為您提供高通量基因敲除服務(wù)，我們的人全基因組基因敲除陣列Array文庫(kù)覆蓋了完整的人類(lèi)全基因組，全基因組陣列敲除庫(kù)已在人原代細(xì)胞全部完成高內(nèi)涵篩選的驗(yàn)證，超過(guò)80%以上的靶點(diǎn)達(dá)到70%以上的敲除效率。

BTP致力于為您提供zuì簡(jiǎn)單易用的高通量CRISPR基因敲除服務(wù)，包括病毒包裝、質(zhì)粒制備、Cas9濃度測(cè)試等，為您解決選擇哪個(gè)細(xì)胞進(jìn)行敲除、可不可以敲除、如何敲除以及敲除效率如何等關(guān)鍵問(wèn)題。可進(jìn)行單/多基因敲除、移碼突變和大序列敲除。您只需提供基因名和目標(biāo)細(xì)胞，百泰派克生物科技負(fù)責(zé)所有項(xiàng)目后續(xù)，包括項(xiàng)目評(píng)估（靶基因是否在目標(biāo)細(xì)胞中表達(dá)、是否是必需基因）、KO實(shí)驗(yàn)、KO細(xì)胞驗(yàn)證、凍存KO細(xì)胞和活KO細(xì)胞交付。

服務(wù)優(yōu)勢(shì)

1.樣本適用性強(qiáng)

適用于人、小鼠的細(xì)胞系，原代細(xì)胞，免疫細(xì)胞及iPS細(xì)胞等。

2.基因必要性及表達(dá)量分析

在進(jìn)行基因敲除實(shí)驗(yàn)前，我們會(huì)基于生物信息學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)數(shù)據(jù)對(duì)不同細(xì)胞中基因必要性及表達(dá)量進(jìn)行分析，確保實(shí)驗(yàn)的可行性，降低實(shí)驗(yàn)風(fēng)險(xiǎn)。

3.gRNA無(wú)需從頭設(shè)計(jì)和驗(yàn)證

我們完成了人類(lèi)全基因組gRNA的全部驗(yàn)證，與藥物相關(guān)的靶點(diǎn)也完成了PCR測(cè)序驗(yàn)證，無(wú)需針對(duì)客戶的靶點(diǎn)設(shè)計(jì)預(yù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行g(shù)RNA驗(yàn)證，大大縮短了項(xiàng)目周期。

4.高通量高效率

我們采用優(yōu)化的CRISPR/Cas9系統(tǒng)進(jìn)行高通量基因敲除，多個(gè)sgRNA/靶基因設(shè)計(jì)保證高敲除效率，超過(guò)80%靶點(diǎn)敲除效率在70%以上，短期內(nèi)（10天內(nèi)）即可提供高敲除效率的KO pool，滿足絕大多數(shù)的應(yīng)用場(chǎng)景。

5.敲除效率雙驗(yàn)證

基因敲除后，我們采用WB實(shí)驗(yàn)中抗體KO驗(yàn)證的shǒuxuǎn方法——Sanger測(cè)序和深度蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)對(duì)敲除效率進(jìn)行雙驗(yàn)證，數(shù)據(jù)真實(shí)性的雙重保障。

應(yīng)用案例

1.基因治療

Dever DP, et al. Nature. 2016.

2.免疫細(xì)胞工程

3.基因功能研究

4.藥物靶點(diǎn)篩選

常見(jiàn)問(wèn)題：

問(wèn)題1.高通量基因敲除技術(shù)對(duì)比傳統(tǒng)基因敲除技術(shù)有哪些優(yōu)勢(shì)？

回答：高通量基因敲除技術(shù)相比傳統(tǒng)基因敲除技術(shù)如慢病毒包裝法和質(zhì)粒法等有以下優(yōu)勢(shì):

1）編輯通量

• 傳統(tǒng)基因敲除技術(shù):通量低，通常2-3個(gè)月完成幾十個(gè)敲除細(xì)胞系的構(gòu)建；

• 高通量基因敲除技術(shù):通量高，通常1-2個(gè)月即可獲得幾百個(gè)敲除細(xì)胞系的構(gòu)建。

2）編輯效率

• 傳統(tǒng)基因敲除技術(shù):敲除效率在30-90%左右，且不均一；

• 高通量基因敲除技術(shù):敲除效率很高，可達(dá)70-100%。

3）KO細(xì)胞儲(chǔ)量

• 傳統(tǒng)基因敲除技術(shù):KO細(xì)胞儲(chǔ)備不足3000+；

• 高通量基因敲除技術(shù):人類(lèi)全基因組覆蓋，KO細(xì)胞儲(chǔ)備高達(dá)19000+。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)蛋白質(zhì)序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)蛋白質(zhì)的氨基酸組成分析，N端測(cè)序，C端測(cè)序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白質(zhì)N端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的蛋白質(zhì)，提供基于從頭測(cè)序法的蛋白質(zhì)從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、蛋白質(zhì)組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量蛋白質(zhì)組學(xué)、靶向蛋白質(zhì)組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種蛋白質(zhì)組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種蛋白質(zhì)標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題。可在單細(xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專(zhuān)有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從蛋白質(zhì)、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋蛋白質(zhì)組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

高通量基因敲除服務(wù)檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹