二硫鍵定位分析檢測技術服務詳情介紹

二硫鍵是蛋白質中的一個重要結構單元，它是由兩個半guāngānsuān氨基酸殘基中的硫原子在氧化環境下形成的，對于生物活性和功能起著決定性作用。二硫鍵廣泛存在于細胞表面受體、抗體、生長因子、激素、酶等蛋白質中，并且容易被還原或發生錯誤配對，導致原始多肽或蛋白質的結構和生物學活性受到影響。二硫鍵定位分析通過確定蛋白質結構中二硫鍵位置和連接方式可以深入了解蛋白質的結構和功能。在生物藥物的制備和研發過程中，錯誤的二硫鍵配對可能會導致藥物失效，甚至可能有潛在的安全風險，因此，對二硫鍵進行準確的檢測和控制是生物制品表征中bìbùkěshǎo的。

圖1 二硫鍵定位分析原理

液相色譜質譜聯用（LC-MS）技術的發展極大提高了檢測的靈敏度和準確性，推動了二硫鍵分析的發展，也在二硫鍵定位分析中發揮著bùkětìdài的作用。百泰派克生物科技BTP通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證。公司根據二硫鍵分析原理，結合高效液相色譜儀與高分辨率質譜儀建立了二硫鍵分析平臺，為您提供jīngzhǔn的二硫鍵定位分析服務，無論鏈內/鏈間二硫鍵、一對/多對二硫鍵、交叉重疊抑或是錯配的二硫鍵，BTP都可進行高效準確的鑒定。歡迎免費咨詢，了解更多詳情！

實驗儀器

• 高效液相色譜儀：Easy-nLC 1200 （Thermo Fisher Scientific）

• 高分辨質譜儀：Q Exactive™ Hybrid Quadrupole-Orbitrap™ Mass Spectrometer（Thermo Fisher Scientific）

案例示意

液相色譜質譜聯用法定位二硫鍵，不進行還原處理，而是直接進行烷基化，這個步驟將游離的巰基封閉。隨后，進行酶切操作，將蛋白質分子切割成小片段。在這個過程中，存在二硫鍵的半guāngānsuān之間形成了特定的連接，導致分子量發生變化。接下來，通過質譜儀采集數據，并使用相應的分析軟件進行數據庫匹配，從而得到二硫鍵的信息。

表1 二硫鍵分析

Site：形成二硫鍵的半guāngānsuān在蛋白中的位置；Enzyme：酶解蛋白所用的酶；Peptide：肽段序列；PeptideMass：肽段分子量；MassError(ppm)：肽段的質量偏差

圖2 肽段二級圖

常見問題

問題1：質譜法鑒定二硫鍵的優勢是什么？

回答：質譜法在鑒定二硫鍵方面具有多個優勢。首先，它不僅可以確定二硫鍵的存在與數量，還能確定二硫鍵的具體位置和相對含量，提供了更詳細的信息。其次，質譜法具有高靈敏度和高分辨率的特點，可以準確地檢測和定量二硫鍵，即使在低濃度下也能獲得可靠的結果。此外，質譜法所需的樣品消耗量相對較少，對于寶貴或有限的樣品而言具有重要意義。因此，質譜法在二硫鍵分析中被廣泛應用，為研究蛋白質結構和功能提供了有力的支持。

問題2：為什么要進行烷基化？

回答：進行烷基化是為了封閉游離巰基，防止實驗過程中二硫鍵發生錯配。在質譜分析中，樣品的制備過程需要進行特殊處理，其中包括烷基化步驟。烷基化是通過將烷基化試劑與巰基反應，使巰基被烷基取代，形成烷基硫醇。這樣可以有效地阻止巰基之間的反應，避免在實驗過程中形成不正常的二硫鍵連接或錯配。通過烷基化處理，可以確保在質譜分析中得到準確而可靠的二硫鍵信息，有助于揭示蛋白質的結構和功能特征。

中/英文項目報告

在技術報告中，百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告，報告包括： 1. 實驗步驟（中英文） 2. 相關的質譜參數（中英文） 3. 二硫鍵定位分析詳細信息 4. 質譜圖片 5. 原始數據

二硫鍵定位分析一站式服務

您只需下單-寄送樣品 百泰派克一站式服務完成：樣品處理-上機分析-數據分析-項目報告

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對蛋白質序列進行分析，提供基于質譜的蛋白測序分析服務，包括對蛋白質的氨基酸組成分析，N端測序，C端測序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白質N端序列分析服務。對于未知理論序列的蛋白質，提供基于從頭測序法的蛋白質從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優勢：

1.采用目前世界上優良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、蛋白質組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC，提供定量蛋白質組學、靶向蛋白質組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種蛋白質組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白質組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析，發現新的生物標記物;

2.體內體外多種蛋白質標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質譜分析靈敏度高，實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統準確。

三、單細胞質譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質量譜，zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。

※服務優勢：

1.技術優良，*技術空白

采用金屬標記抗體技術，避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右，而流式質譜技術一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現了數量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外，質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現

百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質譜技術，MALDI TOF，高效色譜分離技術，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從蛋白質、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析，到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務，幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質譜多組學優質服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證，建立了完備的質量體系，數據冷熱/異地備份，設備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術服務，支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。

1.公司采用ISO9001質量控制體系，zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務；

3.業務范圍覆蓋蛋白質組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等；

4.七大質量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優質的生物質譜分析服務!

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