分光光度計是化學、生物、醫學等領域中常用的實驗儀器，主要用于測量物質的吸光度或透光度，進而分析物質的濃度、純度等性質。本文將詳細介紹分光光度計的使用方法，幫助讀者更好地掌握其操作技巧。
一、儀器準備
預熱儀器：為使測定穩定，應將電源開關打開，使儀器預熱一段時間，通常建議預熱30分鐘以達到穩定工作狀態。預熱儀器時和在不測定時應將比色皿暗箱蓋打開，使光路切斷，防止光電管疲勞。
選定波長：根據實驗要求，轉動波長調節器，使指針指示所需要的單色光波長。請確保波長調整準確，以免影響實驗結果。
二、樣品準備
準備適當的樣品溶液：根據實驗需求，準備適當的樣品溶液。確保溶液清澈透明，無氣泡和雜質。如需要稀釋，請按照一定比例進行稀釋。
準備空白對照溶液：空白對照溶液是與待測樣品溶液具有相同基質的溶液，用于消除實驗過程中的背景干擾。請確保空白對照溶液與待測樣品溶液在基質、濃度等方面保持一致。
三、操作步驟
固定靈敏度檔：根據有色溶液對光的吸收情況，選擇合適的靈敏度檔。通常，為使吸光度讀數為0.2～0.7，可旋動靈敏度檔，使其固定于某一檔，在實驗過程中不再變動。一般測量固定在“1"檔。
調節“0"點：輕輕旋動調“0"電位器，使讀數表頭指針恰好位于透光度為“0"處。此時，比色皿暗箱蓋應打開，光路被切斷，光電管不受光照。
調節T=100%：將盛有蒸餾水(或空白溶液或純溶劑)的比色皿放入比色皿座架中的第一格內，有色溶液放在其他格內。輕輕蓋上比色皿暗箱蓋子，轉動光量調節器，使透光度T=100%，即表頭指針恰好指在T=100%處。
放入空白對照：將空白對照溶液放入測試槽，按下“功能鍵"進行測試。此步驟的目的是為了獲取背景吸光度值，以便后續計算。
放入樣品測試：將待測樣品溶液放入測試槽，按下“功能鍵"進行測試。觀察并記錄測試結果，包括吸光度值、濃度等參數。
四、數據處理
計算吸光度值：根據實驗結果，可計算出待測樣品的吸光度值。吸光度值(A)與樣品濃度(C)之間的關系通常符合比爾-朗伯定律，即A=εbc，其中ε為摩爾吸光系數，b為光程長度，c為樣品濃度。
分析結果：根據吸光度值、濃度等參數，可分析待測樣品的性質，如純度、濃度等。如需進一步分析，可結合其他實驗方法或數據處理軟件進行。
五、注意事項
操作時請佩戴防護眼鏡，避免眼睛受到強光刺激。
請勿將手指或其他物品觸摸到比色皿的透光面，以免影響實驗結果。
在測量過程中，請保持儀器穩定，避免震動或碰撞。
如有異常情況或故障，請及時聯系專業人員進行維修。
通過以上步驟，相信讀者已經掌握了分光光度計的使用方法。在實際操作中，請務必遵循實驗規程和安全操作要求，確保實驗結果的準確性和可靠性。
