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氨基酸分析檢測儀器的定量測定方法
閱讀：1145 發(fā)布時間：2024-6-13
氨基酸分析檢測儀器通常使用高效液相色譜法（HPLC）進(jìn)行定量測定。以下是一般的氨基酸定量測定方法：
樣品制備：
樣品準(zhǔn)備：將待測樣品中的氨基酸進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶崛『皖A(yù)處理，通常采用酸或堿水解、蛋白酶消化等方法，將氨基酸從樣品中釋放出來。
蛋白去除：如果樣品中存在大量的蛋白質(zhì)，需要先進(jìn)行蛋白去除的處理，以避免對后續(xù)分析的干擾。
HPLC分析：
樣品進(jìn)樣：將經(jīng)過預(yù)處理的樣品溶液通過自動進(jìn)樣裝置注入到HPLC系統(tǒng)中。
色譜柱選擇：選擇適當(dāng)?shù)纳V柱，通常采用具有氨基功能團(tuán)的反相色譜柱，如ODS（OctadecylSilane）柱。
洗脫條件：設(shè)置適當(dāng)?shù)南疵摋l件，包括流動相的組成和流速等參數(shù)。通常采用緩沖鹽溶液和有機(jī)溶劑的混合物作為流動相。
檢測方法：選擇適當(dāng)?shù)臋z測波長，常見的是在190-220nm范圍內(nèi)進(jìn)行紫外檢測。
校正曲線：通過使用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)氨基酸溶液建立校正曲線，確定各個氨基酸的濃度與峰面積的關(guān)系。
定量測定：根據(jù)樣品中各氨基酸的峰面積和校正曲線，計算出各氨基酸的濃度。
數(shù)據(jù)處理：
濃度計算：根據(jù)色譜圖上各氨基酸的峰面積和校正曲線，計算出各氨基酸的濃度。
質(zhì)量分析：對測得的氨基酸濃度數(shù)據(jù)進(jìn)行質(zhì)量分析，確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
這是常規(guī)的氨基酸分析檢測儀器的定量測定方法。在實際操作中，還需要根據(jù)具體的儀器型號和試劑盒說明進(jìn)行操作，以確保測試的準(zhǔn)確性和可靠性。