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細胞計數的實驗步驟＆問題分析2024/4/25
細胞計數在細胞實驗中是非常常見的，大多數實驗室目前使用細胞計數板進行細胞計數，細胞計數板的結構如下圖所示：實驗步驟1.所用細胞密度達到一定要求后進行細胞計數鋪板，提前準備好細胞計數板、蓋玻片、計數器；...
DMEM、1640、MEM...這么多培養基有什么不同？2024/4/24
為什么細胞培養基有那么多不同的名字？常見的1640和DMEM有什么不同？培養基應該如何儲存？這一期我們講講細胞培養所用到的培養基。01為什么細胞培養基有那么多不同的名字？培養基有很多不同的名字是因為根...
細胞共培養實驗步驟、技巧，Transwell or Millicell?2024/4/23
實驗目的：研究兩種或三種細胞之間的相互作用實驗簡介：共培養是通過分別在插入式細胞培養小室內外培養兩種或以上細胞，來研究細胞之間的相互作用，例如不同CD亞型的免疫細胞、免疫細胞和腫瘤細胞、飼養層和干細胞...
原位雜交實驗流程2024/4/23
原位雜交組織（或細胞）化學簡稱原位雜交，屬于固相分子雜交的范疇，它是用標記的DNA或RNA為探針，在原位檢測組織細胞內特定核酸序列的方法。一、合成RNA探針1、設計探針引物RNA探針長度500bp最為...
Lipofectamine ™ RNAiMAX轉染2024/4/23
轉染是實驗過程中常用的技術操作，通俗來說，常見的轉染即為把某種功能性質粒轉到細胞中去，通過轉染試劑的作用在經過一段時間后，收集細胞通過WB、qpcr等來檢測質粒是否正常發揮作用來達到我們實驗的某種需求...
如何提高DNA濃度/純度測定的準確性？2024/4/23
分子生物學實驗中經常需要對樣品進行濃度和純度的測定，它相當于一種質控，以此來確保下游實驗的結果可靠。常用的DNA濃度/純度測定設備是紫外分光光度計，它的原理是利用物質分子對紫外可見光譜區的輻射吸收來進...
原代細胞培養入門2024/4/22
大家好！這篇文章是關于原代培養的入門知識，向剛入門的同學科普這個實驗的基礎。包括以下內容：原代培養的概念和流程分離組織的操作和注意事項解離組織獲取細胞的三種常見方法原代培養是指細胞分離之后至第一次傳代...
流式細胞術實驗常見問題分析2024/4/22
流式細胞技術（FlowCytometry,簡稱FCM）是一種高效的方法，用于分析和收集細胞懸液中的單個細胞。FCM的優勢在于其速度快、結果客觀，并且具有重要的統計意義。它能夠處理復雜的樣本，同時收集多...
何時用瓶皿培養，何時用孔板培養2024/4/18
細胞的體外培養需要依附在人工附著物上，大多數脊椎動物細胞在人工附著物上會呈現為單層生長的狀態。所謂的人工附著物，就是常見的多孔板、培養瓶、培養皿。用什么類型的附著物來培養細胞，是有什么依據的呢？這一期...
ELISA實驗經驗總結2024/4/18
前置知識ELISA（Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay，酶聯免疫吸附試驗）是一種常用的實驗技術，用于檢測和定量分析樣品中特定抗原或抗體的存在。ELISA是基于免疫學原理的一...
要做好CCK-8實驗，這三個重要環節請注意2024/4/17
在做細胞基礎實驗時，必要的一步就是需要探究清楚細胞的增殖變化和毒性耐藥變化情況，為下一步實驗做準備。我們在做CCK-8增殖和毒性實驗中常常會遇到一下幾個問題：1.細胞鋪板問題2.給CCK-8的方式問題...
細胞凍存的實驗步驟＆注意事項2024/4/17
細胞凍存實驗用于保護細胞免受損傷，以便在需要的時候重新復蘇和使用，對于保存少有的細胞資源、制備細胞庫、研究細胞生物學等方面具有重要意義。實驗步驟：1.細胞凍存液提前配置：凍存液配置比例根據實驗習慣即可...
三羧酸循環與銅死亡2024/4/15
銅死亡背景2022年3月在Science期刊發表的CopperinducescelldeathbytargetinglipoylatedTCAcycleproteins揭示了銅離子過載會導致細胞死亡，...
細胞消化和傳代經驗分享2024/4/10
一、準備工作試劑準備：培養細胞所需的培養基、胰酶、胎牛血清（簡稱FBS）、雙抗（簡稱P/S）、PBS緩沖液等從4°C的冰箱中取出，于室溫條件下放置至恢復室溫。耗材準備：50ml離心管、15ml離心管及...
Dot blot法鑒定分泌型蛋白表達2024/4/10
實驗原理：Dotblot是一種半定量的蛋白質或核酸檢測方法，其原理是將待測物直接滴于固相載體上，然后通過特異性抗體或探針與待測物結合，最終通過可視化方法來檢測目標分子的存在與否。溶液配置：操作步驟：（...
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