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如何提高 RT-PCR 反應的靈敏度與特異性

時間:2023/6/30閱讀:1514
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1.首先確定模板 RNA 完整性好,無 DNA 污染。

2.RNA 模板中不應含有擴增反應抑制劑。

3.為了防止模板降解,在反應體系中加入 RNase 抑制劑 RNasin。

4.使用適量的模板 RNA,模板量太多會降低特異性,太少會導致擴增不出條帶或條帶太弱。

5.若模板中有二級結構,可通過提高逆轉錄反應溫度來提高擴增效果。

6.設計引物時,避免在引物 3’端含有互補序列,避免形成內(nèi)部發(fā)卡結構。


深圳安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術實力、壹流的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)??偛吭O在廣東,服務面向全國。安培生物集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,旨在為生命科學的發(fā)展提供壹流的產(chǎn)品與服務。本公司建立了涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、信號傳導和神經(jīng)科學等領域的產(chǎn)品供應線,在各個領域內(nèi)向用戶提供世界前沿水平和質量穩(wěn)定的產(chǎn)品,安培生物致力于為廣大的科研機構、高等院校等優(yōu)質客戶提供優(yōu)質的產(chǎn)品、技術支持與服務。


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