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將培養物放在顯微鏡的載物臺上，打開電源，選擇合適的鏡頭，聚焦于標本。如果必要的話，將聚光器和相差環調節在中心。
倒置顯微鏡 擦鏡紙
確保顯微鏡（配有相差10×、20× 或40× 的物鏡及聚光器和合適的相差環）潔凈（用 70 % 乙醇擦拭載物臺。如果有必要，用擦鏡紙清潔物鏡）。
2. 打開電源，將燈光強度從最-低開始調至合適的強度，而不是直接打到強光。
3. 檢查光源與聚光器的銜接：
(a)將一張染色切片、培養瓶或培養皿放在載物臺上；
(b)關閉視場光圈；
(c)聚焦在可變光闌上；
(d)將可變光闌成像調整到視野的中央。
4. 將相差環調至中央：
(a)如果顯微鏡配有相差望遠鏡，將之插入標準目鏡位置，然后聚焦于相差環，檢査聚光器環（黑色背景中的白環）是否與物鏡環（白色背景中的黑環）同軸；
(b)如果沒有相差望遠鏡，則將染色的標本換為沒有染色的培養物（活的或固定的培養物），重新聚焦，調整相差環，直到獲得最-優對比。
5. 觀察細胞。10× 相差物鏡作為常規觀察已足夠，4× 相差物鏡不能提供足夠的細節資料，而高于 10× 的放大倍數則限制了觀察區域。
(a)注意生長期（例如，稀疏、亞匯合、匯合、致密）；
(b)注意細胞狀態（例如，清亮、透明或有顆粒、有空泡等）。
6. 檢査培養基的清亮程度（例如，無碎片、漂浮的顆粒、污染跡象等），根據需要選擇一個放大倍數更高的物鏡。
7. 記錄觀察的結果。
8. 旋低變阻器（把燈光調暗），關掉電源。
9. 將培養液放回孵箱，或放在超凈臺上進行無菌操作。
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