在細胞轉染實驗中,我們常常要根據不同的實驗目的,轉染細胞的不同,選擇我們將要使用的實驗方法。
脂質體介導的轉染是我們的首先選擇,他具有易操作,重復性好,低毒性和適用于懸浮培養體系細胞的特點,在很多轉染方法效率低的情況下,脂質體轉染方法效果很好。
其中,脂質介導轉染試劑的典型,非脂質體型FuGENE6和陽離子脂質體Lipofectamine2000能夠在有血清的干擾下成功轉染細胞,減少轉染的操作步驟。
脂質體介導轉染的原理主要是通過靜電作用,將帶有負電荷的DNA與陽離子脂質結合,形成脂質-DNA復合體。這樣的復合體較為穩定,能夠延緩核酸酶的降解作用。
脂質-DNA復合體通過細胞膜的融合,或細胞的內吞作用,進入到細胞中。
脂質介導法轉染除了基因片段,還可以運載大質粒。除了瞬時轉染,也可以用于建立穩定表達的細胞系。
因此,在其他轉染方法效率低的情況下,可以使用脂質體轉染方法。針對原代細胞或分化細胞,或者轉染大質粒等高分子質量DNA時,也推薦使用脂質體介導轉染。
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