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深圳艾維迪泰生物科技有限公司

細胞培養的相關知識分享

時間:2022-11-30 閱讀:1242
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  細胞培養技術又稱單細胞分離培養技術,即在體外將一個細胞從細胞群中分離出來,使其能夠復制成一個新的細胞群培養體系。由單個細胞形成的細胞群稱為克隆,純化后的細胞群稱為細胞系,即細胞培養。
 
  各細胞的遺傳和生物學特性非常相似和一致,有利于不同細胞群形態和功能的比較研究。
 
  菌落(克隆)計數:在倒置顯微鏡下觀察、計數直徑大于75μm或含有50個以上細胞的克隆。
 
  血細胞計數板細胞數/ml=4個大正方形細胞總數/4×104
 
  細胞計數器/細胞分析儀(凱西,德國)
 
  細胞活力0.4%臺盼藍染色
 
  MTT法可用于評價細胞的相對數量和活性
 
  細胞的冷凍保存和復蘇:
 
  低溫保存:4℃緩慢冷凍60分鐘(可延長)
 
  -20℃下40-60分鐘(不能太長,可以跳過*)
 
  -80℃(半年內轉液氮/過夜)程控冷卻儀表1-3℃/min轉液氮
 
  復蘇:38℃溶解,注意水面不能接觸凍存管蓋邊
 
  上清液以低速(500轉/分)離心除去,加入相同的培養基,輕輕吹掃上清液,接種于適當大小的培養瓶中。

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