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                         P27蛋白試劑盒操作流程 

秋天到了，果子熟了。黃澄澄的是梨，紅通通的是萍果，亮晶晶的是葡萄。一陣涼風吹來，果兒點頭，散發出誘人的香味兒。接下來介紹 P27蛋白試劑盒操作流程 。

操作程序：

1. 棄去液體，甩干，每孔加滿稀釋后洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。如此重復5次，拍干。

2. 每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。。

3. 取出酶標板，每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

4.測定：以空白孔調零，在450nm波長下測量各孔的吸光度值（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

5.根據標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據樣品的OD值在回歸方程上計算出對應的樣品濃度。也可以使用各種應用軟件來計算。應記住由于樣品稀釋了的，其實際濃度應該乘以總稀釋倍數。

試劑盒組成 

1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 6ml×1瓶

2 酶標試劑 6ml×1瓶 8 標準品（16ng/L） 0.5ml×1瓶

3 酶標包被板 12孔×8條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶

4 樣品稀釋液 6ml×1瓶 10 說明書 1份

5 顯色劑A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2張 

6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1個

樣本處理及要求

1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

3. 細胞培養物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。