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采用超高效液相色譜快速分析化妝品用原料月桂 酰甘氨酸
閱讀：372 發(fā)布時間：2025-1-14摘要本文采用配備 Agilent 1290 Infinity II ELSD 的 Agilent 1260 Infinity II 超高效液相色譜系統(tǒng)，建立了一種針對化妝品用原料月桂酰甘氨酸的質(zhì)量控制分析方法，并比較了在不同校準(zhǔn)方式下所得到的實際樣品檢測結(jié)果之間的差異。結(jié)果表明，基于月桂酰甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行定量，所開發(fā)的方法在線性、靈敏度和精密度等方面均滿足方法學(xué)要求；且三種實際樣品的色譜圖比較結(jié)果顯示，月桂酰甘氨酸未受到干擾，表明該方法具有良好的專屬性。
前言在化妝品中，具有面部清潔作用的潔面乳是一大類產(chǎn)品。潔面乳中起清潔作用的一般是表面活性劑，其包括陰離子表面活性劑、陽離子表面活性劑、非離子型表面活性劑和兩性離子表面活性劑。在這些表面活性劑中，作為陰離子表面活性劑的氨基酸類表面活性劑以其溫和、低毒、生物相容性好、發(fā)泡力強(qiáng)、環(huán)境友好等優(yōu)點而得到廣泛應(yīng)用。氨基酸類表面活性劑通常由氨基酸和脂肪酸合成，且常用氨基酸包括肌氨酸、甘氨酸、谷氨酸和絲氨酸等。目前最常見的一類氨基酸類表面活性劑是甘氨酸型表面活性劑，包括椰油酰甘氨酸和月桂酰甘氨酸等。對于此類表面活性劑的質(zhì)量控制，目前見諸報道的方法主要有：采用 LC-UV 在 203 nm 下測定月桂酰谷氨酸含量的方法[1]；采用α-溴代苯乙酮化衍生化方法進(jìn)行樣品前處理，然后利用 LC-UV 在254 nm 下分析不同椰油基氨基酸類表面活性劑中不同鏈長的脂肪酸組成[2]。但對于應(yīng)用日益廣泛的月桂酰甘氨酸，暫未查到相關(guān)檢測方法。因此，有必要建立相應(yīng)的質(zhì)量控制方法來保證月桂酰甘氨酸從原料到成品的質(zhì)量，從而確保化妝品使用的安全性和有效性。其中面臨的挑戰(zhàn)在于，從化學(xué)結(jié)構(gòu)來看，月桂酰甘氨酸與文獻(xiàn)報道的月桂酰谷氨酸一樣，缺乏強(qiáng)紫外吸收基團(tuán)。如果基于末端吸收，使用如文獻(xiàn)[1] 所報道的方法進(jìn)行分析時，可能存在色譜基線波動、測定穩(wěn)定性差等問題。對于此類低紫外吸收或者無紫外吸收的物質(zhì)，利用具有通用性響應(yīng)的蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD) 進(jìn)行檢測，一般能夠獲得較好的靈敏度和基線，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
本文采用配備 Agilent 1290 Infinity II ELSD 的 Agilent 1260 InfinityII 超高效液相色譜系統(tǒng)，建立了一種針對月桂酰甘氨酸的質(zhì)量控制分析方法，取得了比較理想的結(jié)果。
實驗部分試劑和樣品乙腈為色譜級，購自安譜公司；甲酸為色譜級，購自 Sigma 公司；實驗用水為 Millipore Milli-Q 超純水系統(tǒng)現(xiàn)制備的高純?nèi)ルx子水；月桂酰甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)品以及月桂酰谷氨酸鉀樣品 1、樣品 2 和樣品 3 由用戶提供。
儀器和設(shè)備采用 Agilent 1260 Infinity II 液相色譜系統(tǒng)，配備如下安捷倫組件：Agilent 1260 Infinity II 四元泵（部件號 G7104C）、Agilent1260 Infinity II 自動進(jìn)樣器（部件號 G7129C）、Agilent 1260Infinity II 柱溫箱（部件號 G7116A）和 Agilent 1290 Infinity IIELSD（部件號 G7102A）。標(biāo)準(zhǔn)溶液制備標(biāo)準(zhǔn)儲備液：稱取適量月桂酰甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)品，加入乙腈:水 = 60:40的混合溶液，超聲處理 10 min，使其溶解，制得每 1 mL 含 1 mg的溶液，搖勻后待用。標(biāo)準(zhǔn)工作液：精密吸取上述標(biāo)準(zhǔn)儲備液適量，加乙腈:水 = 60:40的混合溶液稀釋成 0.05 mg/mL、0.1 mg/mL、0.25 mg/mL、0.5 mg/mL 和 1 mg/mL 的溶液，搖勻后待用。
樣品前處理分別稱取月桂酰甘氨酸鉀樣品 1、樣品 2 和樣品 3 各 10 mg，置于 10 mL 量瓶中，向其中加入乙腈:水 = 60:40 的混合溶液，超聲處理 10 min，使其溶解，搖勻，分別得到樣品 1、樣品 2 和樣品3 溶液，待進(jìn)樣分析。
結(jié)果與討論線性關(guān)系取各濃度標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)樣至液相色譜系統(tǒng)，在上述色譜條件下進(jìn)行分析，所得色譜圖如圖 1 所示。圖 1 為各標(biāo)準(zhǔn)工作液重疊圖，月桂酰甘氨酸的響應(yīng)與濃度成正相關(guān)。根據(jù)蒸發(fā)光散射檢測器的原理，一般采用雙對數(shù)方式進(jìn)行校準(zhǔn)，即，對峰面積與濃度分別取對數(shù)后進(jìn)行線性回歸分析。通過這種方式得到的校準(zhǔn)曲線如圖 2 所示，且線性回歸方程為log(y) = 1.2536log(x) + 3.9578（其中：y 代表峰面積；x 代表濃度），相關(guān)系數(shù) r = 0.99963。結(jié)果顯示，采用傳統(tǒng)的雙對數(shù)方式，月桂酰甘氨酸可以獲得良好的線性關(guān)系。由于 Agilent 1290 Infinity II ELSD 是一種采用全新雙 PMT 設(shè)計的通用型檢測器，具有較寬的動態(tài)范圍（一般可以達(dá)到 103 次方），在低濃度和高濃度下均具有較好的響應(yīng)一致性。因此，本方法還嘗試對峰面積與濃度進(jìn)行直接線性回歸分析。通過直接線性校準(zhǔn)所得到的校準(zhǔn)曲線如圖 3 所示，且線性回歸方程為y = 8983.5787x – 424.0423，相關(guān)系數(shù)為 r = 0.99890。結(jié)果顯示，由于1290 Infinity II ELSD 的創(chuàng)新設(shè)計，月桂酰甘氨酸采用直接線性校準(zhǔn)，也可以獲得良好的線性關(guān)系。