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使用Ultivo 三重四極桿液質聯用系統分析食品基質中的真菌毒素
閱讀：661 發布時間：2020-6-18摘要：本應用簡報介紹了一種高靈敏度和高精度方法，使用 Agilent Ultivo 三重四極桿質譜儀分析玉米和花生基質中的 12 種真菌毒素，以及黑胡椒基質中的 5 種真菌毒素。Ultivo LC/MS 專為節省實驗室空間，同時保持高通量分析所需的性能而設計。所有真菌毒素均可在低于歐盟委員會法規 (EC) 規定的每種基質高濃度下定量。在 Ultivo 系統上獲得了優異的方法精度，低定量限下的相對標準偏差 (%RSD) < 10%。將基質干擾凈化、色譜分析和新開發的三重四極桿相結合，可靈敏、精確地檢測真菌毒素。
前言：真菌毒素是由各種作物上生長的真菌產生的。在一定濃度和組合情況下，人類和牲畜可通過食用受污染的作物而受到真菌毒素的危害；因此，需要對食品中的真菌毒素含量進行監管，以大程度減小攝入風險[1]。為確保有害濃度的真菌毒素不進入食品供應，監管機構已確定高濃度 (ML)，從某些嬰兒食品中的 0.1 ppb 到某些動物飼料中的 ppm 級水平。很有必要對各種食品基質中低于 ML 濃度的真菌毒素含量進行準確定量分析，因為每種基質組成都會造成不同的挑戰。
專門設計用于解決環境和食品安全分析實驗室所面臨的眾多挑戰。Ultivo 采用的創新技術有助于減小其總體占用面積，同時性能可與傳統系統相媲美（圖 1）。Cyclone Ion Guide 氣旋離子導軌、Vortex Collision Cell 渦流碰撞室和雙曲面四極桿等創新產品，能大程度提高小體積儀器的定量分析性能。這些創新增強了儀器的可靠性和穩定性，從而延長了正常運行時間。 VacShield 真空盾和輕松更換檢測器組件減少了系統維護所需的時間和專業知識，使非專業質譜用戶也可輕松操作和維護。 Agilent MassHunter 軟件套裝簡化了數據采集、方法設置、數據分析和報告。該軟件縮短了從采集到報告的時間，從而提高了實驗室分析效率和可信度。本應用簡報展示了使用新款 Ultivo 三重四極桿 LC/MS 對三種常見受監管食品中多 12 種受監管真菌毒素進行靈敏而精確的定量分析。
實驗部分：試劑與化學品本應用中使用的所有試劑均為 H P LC 或 LC/MS 級。乙腈購自 Honeywell (Morristown, NJ, USA)，超純水產自配有 LC-Pak Polisher 和 0.22 µm 膜式終端過濾器濾芯的 Milli-Q Integral 水純化系統 (EMD Millipore, Billerica, MA, USA)。甲酸 (FA) 和甲酸銨購自 Fluka (Sigma-Aldrich Corp., St. Louis, MO, USA)，氟化銨購自 Aldrich (Sigma-Aldrich Corp., St. Louis, MO, USA)。化學標準品購自 SigmaAldrich 或 Cayman Chemical。
樣品前處理：玉米粉、花生和黑胡椒碎購自當地雜貨店。稱取 5 g 玉米粉、5 g 花生碎（在攪拌器中磨碎，冷凍待分析）或 2 g 黑胡椒碎，置于 50 mL 聚丙烯管中，用 10 mL 乙腈和 10 mL 含 0.2% FA 的超純水進行萃取，然后使用旋轉搖床 (Heidolph HeiMIX Multi reax, 545-10000-00) 振搖 30 分鐘。將 Agilent QuEChERS EN 萃取鹽（部件號 5982-5650）加入萃取物中，將試管再振搖 2 分鐘，然后以 4500 rpm 的轉速離心 5 分鐘 (Sorvall Heraeus, Labofuge 400K)。使用安捷倫通用分散式固相萃取試劑盒（部件號 5982-0029）對黑胡椒萃取物進行額外的凈化步驟。然后，用 0.4 mL 超純水稀釋 1.6 mL 所有萃取物，并用 Agilent Captiva EMR-Lipid 過濾柱（部件號 5190-1003）進行凈化。在分析之前，按照萃取物/超純水 30:70 的比例對加標黑胡椒萃取液進行稀釋。圖 2 顯示了樣品前處理的流程圖。
儀器： Agilent 1290 Infinity II UHPLC • Agilent 1290 Infinity 高速泵 (G7120A) • Agilent 1290 Infinity II Multisampler，配備冷卻裝置 (G7167B) • Agilent 1290 Infinity II 高容量柱溫箱 (G7116B) Agilent Ultivo 三重四極桿液質聯用系統 • 安捷倫噴射流電噴霧離子源
方法表 1 匯總了 Agilent 1290 Infinity II UHPLC 條件。表 2 匯總了 Ultivo 三重四極桿參數和安捷倫噴射流 ESI 離子源參數。采用正離子模式和動態多反應監測 (dMRM) 進行分析。采用具有 Quant-My-Way 功能的 Agilent MassHunter 定量分析軟件 B.09 對數據進行評估。
結論 ：Agilent Ultivo 三重四極桿 LC/MS 是一款創新質譜儀，可以大程度降低對實驗室工作空間的需求，還可減少維護挑戰，使高通量實驗室獲得高效工作環境。Ultivo 是一款體積小而功能強大的工具，能夠對多種食品基質中遠低于規定 ML 的常見受監管真菌毒素進行準確而靈敏的檢測。 Agilent MassHunter 軟件提供了一種采集和報告 LC/MS 數據簡便易用的一體式工具。