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使用 Ultivo三重四極桿液質聯用系統測定亞硝胺雜質
閱讀：1201 發布時間：2020-4-7摘要：新的研究結果表明，某些血管緊張素 II 受體阻滯劑 (ARB) 藥物產品含有致癌性亞 硝胺雜質[1]。因此，這類產品有許多被召回，表明行業迫切需要一種常規分析方法， 來檢出高于目標濃度的致癌性亞硝胺雜質。本應用簡報介紹了基于靈敏的 Agilent Ultivo LC/TQ 的方法工作原理，它不僅適用于美國食品藥品監督管理局 (FDA) 列出的 六種亞硝胺，還適用于同時檢測六種其他可能致突變的亞硝胺雜質。
召回纈沙坦、氯沙坦和厄貝沙坦等 ARB 藥物的宣布使 N-亞硝基雜質成為 FDA 和 歐洲藥品管理局 (EMA) 等監管機構關注 的重點。亞硝胺雜質是這些藥品生產過程 中產生的痕量副產品。這些雜質被歸類 為疑似致癌物（即潛在遺傳毒性雜質）。 本應用簡報介紹了使用 Ultivo 三重四極桿 液質聯用系統進行基于 LC/MS 的分析方 法。在極低檢測限下，對 12 種亞硝胺化 合物進行了全面分析。所有亞硝胺雜質的 分子量都很小，從 74 到 158 不等。雜質 化合物包括： • N-亞硝基二jia胺 (NDMA) • N-亞硝基二乙胺 (NDEA) • N-亞硝基-4-甲基-4-氨基丁酸 (NMBA) • N-亞硝基異丙胺 (NEIPA) • N-亞硝基二異丙胺 (NDIPA) • N-亞硝基二丁胺 (NDBA) • N-亞硝基甲乙胺 (NMEA) • N-亞硝基吡咯烷 (NPyR) • N-亞硝基哌啶 (NPIP) • N-甲基-N-亞硝基苯 (NMPhA) • N-異丙甲基亞硝胺 (NMIPA) • N-叔丁基-N-乙基亞硝胺
實驗部分：化學品與試劑 本研究使用的 12 種亞硝胺標準品均來 自 PS3 Labs LLP, Hyderabad, TS, India。 LC/MS 分析級溶劑（如甲醇、水）購 自 Honeywell。分析中用到的甲酸購自 Fluka。 數據分析 用 Agilent MassHunter 軟件 1.1 版對 Ultivo 采集的數據進行分析。利用 Agilent MassHunter Acquisition Optimizer 軟件 獲得 MS/MS 離子對并對其進行優化， 在進樣分析各種化合物的純溶液（濃度 為 1000 ng/mL，在流動注射模式下進樣 量為 1 µL）時確定佳的母離子、子離 子、碎裂電壓和碰撞能量。
結果與討論：校準濃度范圍為 0.05–100 ng/mL，詳細 信息匯總于表 4 中。所有分析物的 R2 值 均大于 0.996，在整個濃度范圍內表現出 線性響應。圖 1 顯示了 Ultivo TQ 的代表 性疊加 dMRM 色譜圖，展示了所有 12 種 亞硝胺化合物在 10 ng/mL 下的洗脫。
結論：Agilent Ultivo三重四極桿LC/MS液質聯用系統可以在監管要求的低濃度水平下分析亞硝胺 雜質。本應用簡報表明 Ultivo LC/TQ 在檢 測某些低濃度亞硝胺雜質方面的靈敏度。 該方法可用于不同 ARB 藥品中雜質的定 量，并可根據藥品的洗脫模式改變色譜 條件。