詳細介紹
化學結構:
5-Carboxy-TET是一種帶有羧基(-COOH)的熒光染料,屬于TET(Tetrachlorofluorescein)系列熒光素。這種化合物結合了熒光素的光學特性和羧基的化學反應性,廣泛用于生物化學和生物研究中,尤其是在熒光標記和檢測方面。
TET:Tetrachlorofluorescein,是一種熒光素,發(fā)出綠色熒光。
COOH:羧基(-COOH)位于分子的5位,用于化學偶聯(lián)反應。
化學性質:羧基具有酸性,可以與堿發(fā)生中和反應,也可以與胺類或醇類發(fā)生偶聯(lián)反應。
結構式:
基礎知識概述:
155911-13-0,5-Carboxy-TET,TET carboxylic acid
英文名:5-Carboxy-TET,TET carboxylic acid,TET-COOH
分子式:C21H8Cl4O7
分子量:514.1
規(guī)格標準:1mg、5mg、10mg
試劑廠家:陜西新研博美生物科技有限公司
合成方法:
1.羧基化反應
從TET出發(fā),通過化學反應引入羧基。例如,使用鹵代酸或酯化反應引入羧基。
使用鹵代酸(如溴乙酸)或酯化試劑(如DCC和NHS)。
注意事項:
純度標準95%+
保存建議:避免反復凍融,避光保存,儲液應該立即使用,任何未用的溶液分裝小份冷凍于 < -20°C
注意事項:僅用于科學研究
相關應用:
(1)生物標記
蛋白質標記:
通過羧基與蛋白質上的胺基(-NH?)發(fā)生偶聯(lián)反應,將熒光素標記到蛋白質上,用于熒光成像或流式細胞術。
例如,使用N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)酯化反應,將5-Carboxy-TET與蛋白質上的胺基結合。
核酸標記:
通過羧基與核酸末端的胺基修飾位點結合,用于熒光標記的核酸探針。
例如,通過酰胺鍵將5-Carboxy-TET連接到核酸的末端。
(2)熒光探針
細胞成像:
用于標記細胞內的生物分子,通過熒光顯微鏡觀察細胞內的動態(tài)變化。
例如,標記細胞膜蛋白或細胞器蛋白,用于研究細胞的生理過程。
流式細胞術:
用于標記細胞表面或細胞內的生物分子,通過流式細胞儀進行定量分析。
例如,標記細胞表面的受體蛋白,用于檢測細胞的活化狀態(tài)。
(3)藥物遞送
藥物偶聯(lián):
通過羧基與藥物分子上的胺基結合,將藥物分子連接到熒光素上,用于藥物遞送系統(tǒng)的開發(fā)。
例如,將藥物分子與5-Carboxy-TET結合,用于熒光成像指導的藥物遞送。
實驗操作注意事項:
保存條件:應密封保存在干燥、避光的環(huán)境中,避免長時間暴露在空氣中。
反應條件:在進行偶聯(lián)反應時,需要根據(jù)目標分子的性質選擇合適的反應條件(如pH值、溫度、反應時間)。
純化:反應后的產品可能需要通過色譜法(如HPLC)進行純化,以去除未反應的原料和副產物。
應用案例:
(1)蛋白質標記
實驗步驟:
準備蛋白質溶液:將目標蛋白質溶解在適當?shù)木彌_液中。
活化5-Carboxy-TET:將5-Carboxy-TET與NHS和DCC反應,生成NHS酯。
偶聯(lián)反應:將活化的5-Carboxy-TET與蛋白質溶液混合,室溫孵育1-2小時。
純化:通過透析或凝膠過濾去除未反應的染料。
檢測:通過熒光光譜儀或熒光顯微鏡檢測標記效果。
(2)核酸標記
實驗步驟:
準備核酸探針:將核酸探針末端修飾為胺基。
活化5-Carboxy-TET:將5-Carboxy-TET與NHS和DCC反應,生成NHS酯。
偶聯(lián)反應:將活化的5-Carboxy-TET與核酸探針混合,室溫孵育1-2小時。
純化:通過HPLC或凝膠電泳純化標記后的核酸探針。
檢測:通過熒光光譜儀檢測標記效果。
相關試劑(部分):
Carboxy-PEG4-phosphonic acid ethyl ester
MTS-1,5-EDANS-Carboxyethyl
5(6)-Carboxy-X-rhodamine N-Succinimidyl Ester
Amino-Tri-(carboxyethoxymethyl)-methane (HCl)
diSulfo-Cy7 carboxylic acid(Ethyl)
Amino-Tri-(carboxyethoxymethyl)-methane
Mal-Cyclohexanecarboxylicacid
Carboxy-PEG11-phosphonic acid
Carboxy polymethylene
Carboxy-PEG11-sulfonic acid
2-Carboxyethyl methanethiosulfonate
2-Amino-1,3-bis(carboxylethoxy)propane HCl salt
Carboxy-Amido-PEG5-N-Boc
155911-13-0,5-Carboxy-TET,TET carboxylic acid