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技術文章

標記細胞膜及脂溶性生物結構菁類染料DiR,DiI, DiO, DiD

閱讀:1011          發布時間:2021-4-29

DiI, DiO, DiD和DiR作為一類長鏈的親脂性二烷基碳菁類染料(Dialkylcarbocyanines)熒光染料家族,用于標記細胞膜以及其他脂溶性生物結構。作為一類環境敏感型熒光染料,當它們與膜結合或者與親脂性生物分子(例如蛋白質,雖然在水中其熒光強度很弱)結合時,其熒光強度顯著增強。一旦進入細胞后,它們在細胞內質膜中逐步擴散,于最佳濃度條件下可將整個細胞均勻染色。這些染料具很高的淬滅系數,偏光依賴性和很短的激發壽命。

四種染料呈現不同的熒光顏色,DiI(橙色熒光)DiO(綠色熒光)、DiD(紅色熒光)、DiR(深紅色熒光),為活細胞多色彩熒光成像分析和流式細胞術提供了一種便捷的工具。DiO和DiI分別用標準FITC和TRITC濾光器檢測,可結合使用。DiD可被633 nm氦-氖(He-Ne)激光激發,具有比DiI更長的激發和發射光波長,特別適合用于標記具本底熒光的細胞和組織。而DiR在體內活體成像或者示蹤中意義非凡,因其所發射的紅外光可以高效地穿過細胞和組織,并且在紅外光范圍內,其本底熒光水平很低。

本品以DiR的碘鹽形式提供,

英文名:1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindotricarbocyaineiodide,

純度≥95%,適用于熒光檢測研究。

溫馨提示:本產品由陜西新研博美生物科技有限公司提供,該產品僅作科研實驗使用,不支持臨床等研究。

廠  家:陜西新研博美生物科技有限公司

請點擊此處進入陜西新研博美生物科技有限公司展臺查看

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使用方法:

1、染色液制備:

(1)配置DMSO 或 EtOH 儲存液:儲存液用 DMSO 或 EtOH 配置濃度 1~5 mM。

注:未使用的儲存液分裝儲存在-20℃,避免反復凍融。

(2)工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養基,HBSS 或 PBS)稀釋儲存液,配制濃度為 1~5μM 的工作液。

注:工作液最終濃度建議根據不同細胞系和實驗體系來優化。 建議從推薦濃度的 10 倍范圍內開始*濃度的摸索。

2、懸浮細胞染色:

(1)加入適當體積的染色工作液重懸細胞,使其密度為 1×10 6 /mL。

(2)37℃ 孵育細胞 2~20 min,不同的細胞最佳培養時間 不同。可以20 min 作為起始孵育時間,之后優化體系以得 到均一的標記結果。

(3)孵育結束,1000~1500 rpm離心5 min。傾倒上清液, 再次緩慢加入37 ℃預熱的生長培養液重懸細胞。

(4)重復步驟(3)兩次以上。

3、貼壁細胞的染色:

(1)將貼壁細胞培養于無菌蓋玻片上。

(2)從培養基中移走蓋玻片,吸走過量培養液,但表面要 保持濕潤。

(3)在蓋玻片的一角加入 100 μL 的染料工作液,輕輕晃動 使染料均勻覆蓋所有細胞。

(4)37℃ 孵育細胞 2~20 min,不同的細胞最佳培養時間不同。可以20 min作為起始孵育時間,之后優化體系以得到均一的標記結果。

(5)吸干染料工作液,用培養液洗蓋玻片 2~3 次,每次用預溫的培養基覆蓋所有細胞,孵育5~10 min,然后吸干培養基。但要使表面保持濕潤。

溫馨提示:本產品由陜西新研博美生物科技有限公司提供,該產品僅作科研實驗使用,不支持臨床等研究。

純 度:95%

儲存/保存方法:−20°C干燥避光保存,產品有效期為12個月

技術指標:

Ex(nm):748

Em(nm):780

注意事項:

1、熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。

2、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作

基本信息:

別 名:細胞膜熒光探針DiR, DiR細胞膜染料, DiR 碘化物;DiIC18(7)

外 觀:藍色至深藍色油狀固體

可溶性/溶解性:溶于DMF,DMSO,甲醇

參考文獻:Cheng Z, et al. (2004). Differential control over postganglionic neurons in rat cardiac ganglia by NA and DmnX neurons: anatomical evidence. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol 286, R625-33; Koo YE, et al. (2004). Real-time measurements of dissolved ox

分子結構圖:

DiR 結構式

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