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Annexin V-APC/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒

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更新時間:2022-04-20 13:02:30瀏覽次數:367

聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現貨 規格 50T|100T
貨號 FS-X9700 應用領域 化工
主要用途 公司產品僅用于科研    
Annexin V-APC/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒公司*的商品:維生A抗體科羅索 COROSOLIC ACID(P)Human, Mouse, Rat
蛋白聚糖Versican抗體科羅索 COROSOLIC ACID(P)Human, Mouse, Rat
VWCE抗體可替寧 COTININE(RG)Human, Mouse, Rat
視神經視網膜相關蛋白VAX1抗體2-鄰香豆 COU

詳細介紹

培養操作步驟:

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

產品屬于:

中文名稱

英文名稱

產品規格

發貨周期

Annexin V-APC/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒


50T|100T

1~3天

 

商品介紹:

細胞凋亡是細胞的基本特征之一,它在機體的胚胎發育、組織修復、內環境的穩定和一些疾病發生過程等方面起著十分重要的作用。

在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細胞膜脂質雙層的內側,而在細胞凋亡早期,細胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側。在體內,巨噬細胞可以識別翻轉到細胞膜表面的PS 從而將這些程序性死亡的細胞清除,因此凋亡過程中并不伴隨局部的炎癥反應,而在細胞壞死的過程中則常常伴隨著炎癥反應。

AnnexinⅤ是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,能與細胞凋亡過程中翻轉到膜外的PS 高親和力特異性結合。PS 外翻發生在細胞核破裂,DNA 片段化以及凋亡相關蛋白出現之前,這使得Annexin V 與PS的結合成為凋亡早期的一種重要檢測標志事件。

檢測原理:

在正常的活細胞中,磷脂酰絲氨酸(phosphotidylserine,PS)位于細胞膜的內側,但在早期凋亡的細胞中,PS 從細胞膜的內側翻轉到細胞膜的表面,暴露在細胞外環境中。

Annexin-Ⅴ能與PS 高親和力結合。可通過細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。用標記了APC的AnnexinⅤ作為熒光探針,利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發生。細胞壞死的過程中也會發生細胞膜損傷,壞死的細胞會結合Annexin V-APC。

Annexin V-APC 通常與細胞膜非滲透性核酸熒光染料聯合使用以檢測凋亡細胞。常用的染料是7-AAD。正常細胞和早期凋亡細胞的細胞膜是完整的,核酸染料7-AAD 不能透過完整的細胞膜,但在凋亡中晚期的細胞和壞死細胞,7-AAD 能夠透過細胞膜與細胞核結合呈現紅色。

7-AAD/Annexin V-APC試劑盒將Annexin Ⅴ與7-AAD匹配使用,可以將凋亡早期的細胞和晚期的細胞以及死細胞區分開來。壞死細胞可以同時與Annexin V-APC和7-AAD 結合顯色,而7-AAD 則被排除在活細胞(APC陰性)和早期凋亡細胞(APC陽性)之外。在沒有巨噬細胞的情況下,凋亡的后階段會像細胞壞死一樣發生整個細胞的解體,從而使凋亡晚期的細胞也同時被APC和7-AAD 結合染色呈現雙陽性。

儲存條件:染色液2-8℃避光保存;結合液2-8℃保存;長期不用-20℃保存。

Annexin V-APC染色液避免反復凍融,凍融2次以上可能會失效。長期保存分裝后-20℃保存。

有效期:一年。
實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

格列齊特英文名稱: Mizolastine先天性紅生成異常性貧血蛋白1抗體包裝100ml

磺丁脲英文名稱: Mycophenolate Mofetil癌胚抗原相關粘附分子16抗體包裝25ml

米格列英文名稱: Mycophenolate Mofetil癌胚抗原相關粘附分子21抗體包裝100g

米格列奈鈣英文名稱: Nelarabine貓眼綜合征染色體候選基因5抗體包裝25g

瑞格列奈英文名稱: Nesiritide AcetateCUE結構域蛋白1抗體包裝5g

特力利汀;氫替格列汀英文名稱: Netilmicin Sulfate卷曲螺旋結構域蛋白52抗體包裝1g

鹽二雙胍英文名稱: Netilmicin Sulfate補體片段C3c抗體包裝5g

(+)-(標準品)英文名稱: Nystatin卷曲螺旋結構域蛋白68抗體(皮膚T淋巴淋巴瘤相關抗原)包裝5MG

(+)2-基丁(標準品)英文名稱: Olanzapine卷曲螺旋結構域蛋白83抗體包裝1g

(+/-)-兒茶精(標準品)英文名稱: Olanzapine卷曲螺旋結構域蛋白21抗體包裝5g

(S)-(+)-(普瑞巴林雜質)(標準品)英文名稱: Ondansetron HCl卷曲螺旋結構域蛋白6抗體(狀狀腺癌編碼蛋白)包裝25g

1,4-對醌(標準品)英文名稱: Ondansetron HCl周期依賴激2相關蛋白2抗體包裝5g

1-基海因鹽鹽(標準品)英文名稱: Ornidazole1號染色體開放閱讀框201抗體包裝100mg

1-基海因(標準品)英文名稱: Ornidazole卷曲螺旋結構域蛋白7抗體包裝25g

10%A晶型咪唑英文名稱: Oxaliplatin卷曲螺旋結構域蛋白80抗體包裝5g

酚節桿菌Arthrobacter│chlorophenolicus 質量規格:>99%,BR,可用于培養血小板衍生生長因子BB試劑盒野百合堿;Monocrotaline

副豬嗜血桿菌Haemophilus│parasuis 質量規格:HPLC>98%,標準品血小板衍生生長因子AA試劑盒鹽育亨賓;Yohimbine hydr

: AS4.360資源名稱: 燼灰鏈霉菌 質量規格:>99.0%,培養級血小板型磷果糖激試劑盒巖白菜;Bengenin
Annexin V-APC/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒氧化釤

其他 三氧化二釤

英文名稱: Samarium oxide

其他英文名稱: Samarium(III) oxide

產品規格: 3N

包  裝: 10克/25克/100克/500克

產品規格: SP,99.5%

包  裝: 1克

CAS號:12060-58-1

Sm2O3=348.72

級別:3N

含量:≥99.9%

級別:SP

含量:≥99.5%

稀土雜質:≤0.01%

非稀土雜質:≤0.002%

性狀:黃粉末。露置空氣中吸收水分和二氧化碳。溶于,不溶于水。相對密度 8.347。熔點 2300±50℃。半數致死量(小鼠,腹腔)365mG/kG

用途:生化研究。發射光譜分析標準。乙脫氫反應催化劑。中子吸收劑,核動力反應中用作控制棒。磁性材料、記憶元件的原料

保存:RT

 


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