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乙型肝炎病毒cccDNA PCR試劑盒

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更新時間:2022-04-14 10:42:46瀏覽次數:284

聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現貨 規格 50次
貨號 FS-P013413 應用領域 化工
主要用途 公司產品僅供科研    
乙型肝炎病毒cccDNA PCR試劑盒正在出售的產品:Cortactin (Phospho-Tyr466) Antibody
CREB (Phospho-Ser129) Antibody
p62Dok (phospho-Tyr362) Antibody

詳細介紹

實驗外包:

1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析

2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR

8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建

產品名稱

規格

貨號

乙型肝炎病毒cccDNA PCR試劑盒

50次

FS-P013413

 

QQ截圖20201022162313.png 

組成及試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,

多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

一個是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒。

三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)

10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數量相應增加2或3倍。

11. 產品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實驗步驟:

①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

特別提示:本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!

(MAG Ab)ELISA Kit 大鼠抗髓鞘相關糖蛋白抗體Multi-class antibodies: 48T

 SYK 非受體型酪蛋白激抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat  Guinea pig IgG/PE PE標記的羊抗豚鼠IgG  0.1ml

BK(Mouse bradykinin) ELISA Kit 小鼠血管舒緩激肽 96T

NOR1 神經元衍生孤兒受體1抗體 0.2ml

BPI /通透性增強蛋白抗體 0.2ml

 SYK 非受體型酪蛋白激抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

BP180-Ab(Human  Bullous Pemphigoid 180 antibody) ELISA Kit 人抗BP180抗體Multi-class antibodies: 48T

 IL-17F/IL-24 白介-17F抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Lubricin/SZP 淺表層粘膜蛋白多糖抗體  0.2ml

BALP(Human bone alkaline phosphatase) ELISA Kit 人骨性磷 96T

Rab11 ras癌基因家族Rab11蛋白抗體 0.1ml

Phospho-Cyclin B1 (Ser133) 磷化周期B1抗體 0.1ml

 IL-17F/IL-24 白介-17F抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rabbit  mouse Kappa light chain/Gold 膠體金標記的兔抗小鼠k鏈 0.5ml

GCDFP15 特異性囊腫病液體蛋白15 0.2ml

Rhesus antibody Rh Anthrax 炭疽桿菌抗體  0.2ml

 IL-21/FITC 熒光標記白介21抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  human IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗人IgM  0.1ml

 Rbms3 protein/FITC 熒光標記Rbms3 protein抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
乙型肝炎病毒cccDNA PCR試劑盒磚紅色微桿菌種屬: Microbacterium testaceum分離基物: Chinese paddy提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: Type strain培養基: 營養肉汁瓊脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。生長條件: 30℃,好氧存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

中國臺灣鞘氨醇單胞菌種屬: Sphingomonas│formosensis分離基物: 易北河河提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 降解萘、菲和芘。培養基: CM0847生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法

偶發分枝桿菌偶發亞種種屬: Mycobacterium│Mycobacterium fortuitum subsp fortuitum提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應用領域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法

谷氨棒桿菌種屬: Corynebacterium│glutamicum提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 產L-亮氨。培養基: CM0002生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法

角蛋白19(CK-19)ELISA試劑盒草鍶 5N,99.999%三聚硫  95%奈韋拉平

角蛋白18-M65(CK 18-M65)ELISA試劑盒四硫磺鈉,二 98%偏硅鈉,五 95%奈韋拉平(標準品)

角蛋白18-M30(CK 18-M30)ELISA試劑盒硫-5-羥色肌酐 98%零偏硅鈉 SiO2, 44-47% 磺甲惡唑

角蛋白18(CK-18)ELISA試劑盒(-)-鹽東莨菪 ≥99.0% 偏硅鈉,九 AR磺甲惡唑(標準品)

角蛋白17(CK17)ELISA試劑盒(-)-鹽東莨菪 分析標準品,99.0% 鈦四丁酯 CP,98.0%硫頭孢匹羅

角蛋白13(CK-13)ELISA試劑盒糖精鈉 分析標準品鈦四丁酯 ≥99.0% (GC)硫頭孢匹羅(標準品)

間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒環草隆 分析標準品薯蕷皂 90%阿米舒必利

間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒2,4,5-涕  分析標準品橙皮 分析標準品, ≥98%阿米舒必利(標準品)

間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒乙鈉,無 電泳級, ≥99%橙皮 97%非諾貝特

間粘附分子1(ICAM-1)ELISA試劑盒十二基硫鈉 分子生物學級,≥98.5% (GC)番茄紅 分析標準品,≥95%非諾貝特(標準品)

T相關抗原4(CTLA-4/CD152)ELISA試劑盒十二基硫鈉 離子對色譜級,≥99.0% (GC)胡椒 分析標準品,>98% 鹽莫西沙星

相關蛋白A(CagA)ELISA試劑盒化釤(III),六 99%槲皮苷 分析標準品,≥98%鹽莫西沙星(標準品)

(CTX)ELISA試劑盒氟化銀(I)  99%白藜蘆 分析標準品昔美沙美特羅

凋亡抑制因子(IAP)ELISA試劑盒四丁酚 試劑級迷迭香 分析標準品,≥97%萘普生

凋亡相關斑點樣蛋白(PYCARD)ELISA試劑盒噻隆 分析標準品2,6-二-4-三氟 98%萘普生(標準品)

系統性紅斑狼瘡(SLE)ELISA試劑盒噻隆 用于植物培養2,6-二-4-氨基酚 98%潑尼松


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