化工儀器網
詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠星形膠質采用酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的小鼠星形膠質經GFAP免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 小鼠神經星形膠質原代細胞 | 組織來源 | 腦組織 |
英文名稱 | Mouse Astrocyte cells | 貨號 | YS-01X7485 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠星形膠質細胞分離自腦組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質（灰質）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是元胞體集中的地方。內部則是由纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面，即外側面（約占整個皮質面積的1/3）、內側面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。星形膠質細胞，是哺乳動物腦內分布廣泛的一類細胞，也是膠質細胞中體積大的一種。用經典的金屬浸鍍技術（銀染色）顯示此類膠質細胞呈星形，從胞體發出許多長而分支的突起，伸展充填在細胞的胞體及其突起之間，起支持和分隔細胞的作用。細胞突起的末端常膨大形成腳板或稱終足，有些腳板貼附在鄰近的毛細血管壁上，因此這些腳板又被稱為血管足或血管周足，靠近腦脊髓表面的腳板則附著在軟膜內表面，彼此連接構成膠質界膜。細胞剛分離時呈圓形，24h后大部分細胞貼壁，均勻分布于瓶底，部分細胞伸出細小突起，培養4-5d后細胞數量明顯增多，呈扁平、多角形，胞質豐富且核漿較少，細胞核呈橢圓形，偏于胞體一側。星形膠質細胞是中樞系統的重要細胞組成，不僅具有支持功能，還能夠合成及分泌多種活性物質，在維持元內外環境、生存、遷移、免疫調節、信號轉導、軸突生長及功能整合等方面具有重要作用。
培養信息：
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
軟骨細胞生長添加物CGS | 白介素11受體α/IL-11Rα抗體 |
PDZ結構域PDZK8蛋白抗體 | 軟骨衍生形態發生蛋白1抗體 |
胚胎干細胞RAS蛋白抗體 | 黑素皮質素受體5抗體 |
2號染色體開放閱讀框71抗體 | 酶動力蛋白2抗體 |
酸化細胞角蛋白8抗體 | 羥類固醇脫氫酶17β3抗體 |
EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人齒根膜韌帶成纖維細胞(HPDLF)( 5×105 ) rEPC，大鼠內皮祖細胞-骨髓 Rattus |
婆羅門牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-3 | ACVR2B Others Cynomolgus 食蟹猴 ACVR2B / ACIIB 人細胞裂解液 (陽性對照) |
ICAM2 Others Human 人 CD102 / ICAM2 人細胞裂解液 (陽性對照) | CPLX3 Others Human 人 CPLX3 / Complexin 3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Hela 299(人細胞) 5×106cells/瓶×2 上皮細胞培養基-2EpiCM-2 | HA Others H4N8 甲型流感 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CM-H069人膀胱平滑肌細胞培養基100mL | 小鼠神經星形膠質原代細胞黑素皮質素受體5抗體 |
8. 骨骼肌細胞系統 | 敘利亞倉鼠肌肉細胞;GH-M1 |
人腸微血管內皮細胞裂解物HIMECL | A-431(人表皮癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H131人角膜成纖維細胞培養基100mL 人羊膜細胞;HA |
小鼠淋巴瘤細胞;P388D1(IL-1) 小鼠胃粘膜上皮細胞培養基 100mL | 過敏毒素C4/補體C4抗體 |
生物鐘KAT13D蛋白抗體 | CLEC5A Others Cynomolgus 食蟹猴 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
腫瘤轉移抑制蛋白BAMBI抗體 | 酸化細胞核分離基因C蛋白抗體 |
腸和大腦特定同源蛋白1抗體 | EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
化工儀器網