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詳細(xì)介紹
小鼠全骨髓原代細(xì)胞
小鼠全骨髓細(xì)胞分離自骨髓；骨髓是機(jī)體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細(xì)菌、病毒等；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(zhǎng)骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時(shí)，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細(xì)胞增多，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。全骨髓細(xì)胞即骨髓內(nèi)除紅細(xì)胞外的全部細(xì)胞。
英文名稱 | Mouse Whole Bone Marrow Cells | 組織來(lái)源 | 骨髓 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7628 |
細(xì)胞形態(tài) | 圓形 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠全骨髓細(xì)胞
組織來(lái)源：骨髓
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠全骨髓細(xì)胞采用沖洗骨髓、紅細(xì)胞裂解法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠全骨髓經(jīng)過檢測(cè)，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
CFSC-2G細(xì)胞，大鼠肝星形細(xì)胞 7721(7721肝癌細(xì)胞) tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6 | 核蛋白易位啟動(dòng)子區(qū)域TPR抗體 |
S期激酶活化蛋白DBF4A抗體 | 嘧啶CYP2D1抗體 |
螺旋轉(zhuǎn)錄因子OTP抗體 | 蛋白質(zhì)精甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 |
細(xì)胞鉀氯離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 | 前列腺酸性酸酶抗體 |
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基4抗體 | 脊髓灰質(zhì)炎受體相關(guān)蛋白4抗體 |
EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (His 標(biāo)簽) | 小鼠淋巴瘤細(xì)胞;P388D1(IL-1) |
H9c2細(xì)胞，大鼠心肌細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞,HepG2/2-15細(xì)胞 CL-0128JeKo-1(人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 二氫還原酶缺陷型中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr- |
人淋巴成纖維細(xì)胞HLF | MCF 7B(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | CL-0259BC-020(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
HFF細(xì)胞，小兒細(xì)胞 小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞,SH2細(xì)胞 星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基AM | 小鼠全骨髓原代細(xì)胞蛋白質(zhì)精甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 |
黑色素細(xì)胞生長(zhǎng)生長(zhǎng)添加物MelGS | SPC-A-1細(xì)胞，肺腺癌細(xì)胞 人口腔癌細(xì)胞,HB細(xì)胞 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3 |
表達(dá)小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細(xì)胞;293KB 人輸尿管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 新生牛眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;NBTF |
U-2 OS人骨肉瘤細(xì)胞 U-2 human osteosarcoma cell line OS McCoy's 5A+10%FBS | 碳酸酶1抗體 |
富含亮重復(fù)序列Nogo受體反應(yīng)蛋白4抗體 | 人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Daoy |
原癌基因N-Ras抗體 | 胞質(zhì)分裂調(diào)控蛋白1抗體 |
酪蛋白激酶A4受體抗體 | EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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