化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠臍靜脈內皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的小鼠臍靜脈內皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠臍靜脈內皮原代細胞 | 組織來源 | 臍帶組織 |
英文名稱 | Mouse Umbilical Vein Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X7672 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠臍靜脈內皮細胞分離自臍帶組織；它是臍靜脈的重要結構組成細胞之一，在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構，臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中，子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管，與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質的交換。臍動脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運送至胎盤，臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質從胎盤運送給胎兒。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
上皮細胞生長添加物-2EpiCGS-2 | KB抑制蛋白激酶α/β抗體 IKK α/IKK β |
細胞表面受體PILRβ抗體 | 兔抗雞IgY抗體 |
表皮生長因子受體III型突變體抗體 | Meteorin膠質細胞分化調節(jié)蛋白抗體 |
細胞角蛋白17抗體 | 死亡相關轉錄因子1抗體 |
酸化周期素D3抗體 | 肝癌衍生生長因子抗體（高遷移率族蛋白1樣蛋白2抗體） |
CTNNB1 Others Human 人 beta-Catenin / CTNNB1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | ACVR2A Others Mouse 小鼠 ACVR2A / AcIIa 人細胞裂解液 (陽性對照) |
氣管上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | MAP4K5 Others Human 人 MAP4K5 / MEKKK5 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
TNFRSF21 Others Mouse 小鼠 DR6 / TNFRSF21 人細胞裂解液 (陽性對照) | LILRB1 Others Human 人 LILRB1 / CD85 / ILT2 / ILR1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
F11 Others Human 人 F11 / FXI 人細胞裂解液 (陽性對照) | SCN3B Others Human 人 SCN3B 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CM-H093人顱蓋造骨細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠臍靜脈內皮原代細胞Meteorin膠質細胞分化調節(jié)蛋白抗體 |
DDR2 Others Rat 大鼠 DDR2 Kinase / CD167b 人細胞裂解液 (陽性對照) | FGF18 Protein Mouse 重組小鼠 FGF18 / FGF-18 蛋白 (His 標簽) |
人腸平滑肌細胞cDNAHISMC cDNA | A549(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R003大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞培養(yǎng)基100mL 人浸潤性導管癌旁皮膚細胞;CCD-1095Sk |
CL-0054Calu-3(人肺腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 細胞角蛋白19，17，14，42，10抗體 |
腸道內富含的Kruppel樣因子13 | EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人細胞裂解液 (陽性對照) |
障礙自整合蛋白BAF抗體 | 1號染色體開放閱讀框63抗體 |
腸和大腦特定同源蛋白2抗體 | CTNNB1 Others Human 人 beta-Catenin / CTNNB1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
化工儀器網(wǎng)