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詳細介紹
小鼠腦動脈血管內(nèi)皮原代細胞
小鼠腦動脈血管內(nèi)皮細胞分離自腦動脈組織；腦動脈有成對的頸內(nèi)動脈和椎動脈互相銜接成動脈循環(huán)；靜脈系多不與同名動脈拌行，所收集的靜脈血先進入靜脈竇再匯入頸內(nèi)靜脈；各級靜脈都沒有瓣膜，它包括腦的動脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng)。腦動脈血管內(nèi)皮細胞主要功能：①維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡；②合成和分泌細胞因子和介質(zhì)；③維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡。
英文名稱 | Mouse Brain Artery Vascular Endothelial Cells | 組織來源 | 腦動脈組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7334 |
細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠腦動脈血管內(nèi)皮細胞
組織來源：腦動脈組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL（0.1mg/ml）或明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
方法簡介
普諾賽實驗室分離的小鼠腦動脈血管內(nèi)皮采用膠原酶-蛋白酶混合消化法并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
普諾賽實驗室分離的小鼠腦動脈血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
星形膠質(zhì)細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | Irx3蛋白抗體 |
棕櫚酰蛋白硫酯酶1抗體 | 細胞因子誘導(dǎo)凋亡抑制因子1 |
RNA結(jié)合蛋白9抗體 | 肌球蛋白輕鏈激酶抗體 |
細胞質(zhì)連接蛋白1抗體 | 凋亡相關(guān)蛋白激酶2抗體 |
酪蛋白激酶1/casein kinase Iα抗體 | 熱休克蛋白70家族蛋白6抗體 |
ANGPTL4 Others Human 人 ANGPTL4 人細胞裂解液 (陽性對照) | CTSZ Others Mouse 小鼠 CTSX 人細胞裂解液 (陽性對照) |
犬腎細胞;MDCK(NBL-2) | IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) |
MCAM Others Human 人 CD146 / MCAM 人細胞裂解液 (陽性對照) | LILRB3 Others Mouse 小鼠 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 人細胞裂解液 (陽性對照) |
MA-891(小鼠癌高轉(zhuǎn)移細胞) 5×106cells/瓶×2 腦成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | NRG1 Others Human 人 NRG1-alpha (ECD) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CM-H124人腦微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠腦動脈血管內(nèi)皮原代細胞肌球蛋白輕鏈激酶抗體 |
TLR3 Others Mouse 小鼠 TLR3 / CD283 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | b16 小鼠黑色素瘤細胞 |
人表皮角質(zhì)細胞-裂解物HEK-a L | SW 780(人膀胱移行細胞癌) 5×106cells/瓶×2 5637(人膀胱癌細胞) |
Hep G2細胞，肝癌細胞 人細胞(HPV-18永生化細胞),HeLa229細胞 人臍帶間充質(zhì)干細胞cDNAHUMSC cDNA | CD20抗體 |
KLF樣轉(zhuǎn)錄因子8抗體 | IL2RG Others Human 人 IL2RG / CD132 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
骨形態(tài)發(fā)生蛋白8b抗體 | 軸突蛋白3抗體 |
G蛋白偶聯(lián)受體102抗體 | ANGPTL4 Others Human 人 ANGPTL4 人細胞裂解液 (陽性對照) |
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