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詳細介紹
小鼠角膜內皮原代細胞
小鼠角膜內皮細胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部薄。角膜有十分敏感的末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細胞層、前彈力層、基質層、后彈力層、內皮細胞層。角膜的高度透明性和光學性是正常發揮生理功能的必要條件之一，而角膜內皮細胞（CEC）在維持角膜的正常生理功能方面起重要作用。角膜內皮細胞是角膜內層的單層細胞，構成了后彈力層和房水之間的物理屏障，通過離子“泵"功能調節角膜中離子濃度和水分，維持角膜的半脫水狀態，保證角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜內皮細胞功能出現紊亂，常導致角膜水腫而使角膜部分甚至失去透明性。角膜內皮細胞主要功能有：①角膜是的無血管的組織，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能；②角膜內皮細胞對角膜透明性有重要作用；③角膜內皮細胞通過Na+-K+-ATP酶活性，維持角膜和房水內Na+梯度，防止水分滲入角膜內，維持角膜實質層相對脫水狀態，維持透明性。
英文名稱 | Mouse Corneal Endothelial Cells | 組織來源 | 眼角膜組織 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X7543 |
細胞形態 | 內皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：小鼠角膜內皮細胞
組織來源：眼角膜組織
產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠角膜內皮采用混合膠原酶消化結合內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的小鼠角膜內皮經NSE（元特異性烯醇化酶）免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
HUVEC細胞，人臍靜脈血管內皮細胞 人肝細胞正常,HL-7702細胞 CL-0072Daudi(人淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2 | 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α抗體 |
S100B蛋白抗體 | 細胞角蛋白2抗體 |
蛋白多糖4/黑色素瘤相關蛋白抗體 | 蛋白酸酶2C抗體 |
損傷誘導蛋白2抗體 | 葡萄糖調節蛋白94抗體 |
鋅指蛋白IKAROS抗體 | 激活激酶PAK7抗體 |
人APP-PS1雙基因轉染CHO細胞株;7WPS1 | CL-0445Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2 |
MM, 小鼠小膠質細胞 R3細胞 C2C12(人肌肉成纖維細胞瘤) | 人細胞;Hela 229 [HeLa229] |
滋養層細胞培養基TM | EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0909 |
雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12 | CL-0236U-2 OS(人骨肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2 |
猴源細胞 T細胞白血病，6T-CEM細胞 COLO-320(結腸腺癌細胞) | 小鼠角膜內皮原代細胞蛋白酸酶2C抗體 |
骨骼肌細胞培養基SkMCM-prf | BALB/3T3細胞，BALB/C小鼠胚成纖維細胞 人胰腺癌細胞,PC-2細胞 CM-M024小鼠淋巴成纖維細胞培養基100mL |
CW-2(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 表皮角化細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | HBE(人支氣管上皮樣細胞) 5×106cells/瓶×2 |
LCC1 人癌細胞 | 髓樣分化蛋白抗體 |
富半肝素結合蛋白61抗體 | 人食道上皮細胞裂解物HEEpiCL |
有絲分裂激酶B抗體 | 半乳糖凝集素1抗體 |
跨膜蛋白TMEM176B抗體 | 人APP-PS1雙基因轉染CHO細胞株;7WPS1 |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
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