詳細介紹
小鼠甲狀腺濾泡上皮原代細胞
小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞分離自甲狀腺組織;甲狀腺是脊椎動物非常重要的腺體,屬于內(nèi)分泌器官。在哺乳動物身體中,它位于頸部甲狀軟骨下方,氣管兩旁。甲狀腺表面有結(jié)締組織被膜,表面結(jié)締組織深入到腺實質(zhì),將實質(zhì)分為許多不明顯的小葉,小葉內(nèi)有很多甲狀腺濾泡和濾泡旁細胞。甲狀腺控制使用能量的速度、制造蛋白質(zhì)、調(diào)節(jié)機體對其他賀爾蒙的敏感性。甲狀腺依靠制造甲狀腺素來調(diào)整這些反應(yīng),有T3和T4。這兩者調(diào)控代謝、生長速率還有調(diào)解其他的身體系統(tǒng)。T3和T4由碘和酪胺酸合成。甲狀腺也生產(chǎn)降鈣素,調(diào)節(jié)體內(nèi)鈣的平衡。其中,甲狀腺濾泡上皮細胞(也稱為濾泡細胞或主要細胞)是在甲狀腺細胞是負責(zé)生產(chǎn)和分泌甲狀腺激素,甲狀腺素(T4)和三碘甲狀腺原(T3)。
英文名稱 | Mouse Thyroid Follicular Epithelial Cells | 組織來源 | 甲狀腺組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7094 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞
組織來源:甲狀腺組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠甲狀腺濾泡上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠甲狀腺濾泡上皮經(jīng)TG(甲狀腺球蛋白)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
腎系膜細胞Many types of cells包裝:5 ×105次方(1ml) | 酸化白介素2受體β鏈抗體 |
原鈣粘蛋白1抗體 | 細胞色素 P450 17A1抗體 |
細胞分裂周期樣蛋白20抗體 | 鋅指蛋白144抗體 |
2號染色體開放閱讀框84抗體 | D酪激酶衰減蛋白2抗體 |
1號染色體開放閱讀框110抗體 | A型流感病毒H5N1凝集素抗體 |
AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人肝細胞;QSG-7701 [QSG7701] 人呼吸道上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS(RA.1) | 人上皮細胞(HMEpiC) (5×105) |
TT(人甲狀腺導(dǎo)管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 NCI-H838 [H838](人肺癌細胞) | DPEP2 Others Human 人 DPEP2 / MBD-2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
VSIG4 Others Mouse 小鼠 VSIG4 人細胞裂解液 (陽性對照) | HCC38細胞,人導(dǎo)管癌細胞 昆蟲細胞系,SF-9細胞 肝動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
CM-M020小鼠上皮細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠甲狀腺濾泡上皮原代細胞鋅指蛋白144抗體 |
大鼠骨骼肌成肌細胞;L6 惡性黑色素瘤細胞,A-375[A375]細胞 RF/6A細胞,綠猴猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細胞 | 人男性正常細胞;Hs68 |
兔晶體上皮細胞永生系;N/N1003A(RLE) | HFE2 Others Cynomolgus 食蟹猴 Hemojuvelin / HFE2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
小鼠胚胎成纖維細胞(MEF-mt)(5×105) Hep G2, 人肝癌細胞系 Human | 12號染色體開放閱讀框29抗體 |
離子通道蛋白Kv3.3抗體 | Acc-2細胞,涎腺腺樣囊性癌細胞 人胃腺癌細胞,MGC-803細胞 兔晶體上皮細胞永生系;N/N1003A(RLE) |
酸化蛋白酪激酶ATK抗體 | N-乙基順丁烯二敏感融合蛋白抗體 |
G蛋白α抗體 | AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人細胞裂解液 (陽性對照) |